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Molecular Probes™ Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 Proteinsynthese-Assay-Kit
Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 Proteinsynthese-Assay-Kit
Marke: Molecular Probes™ C10456
778.24 CHF gültig bis 2024-12-20
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Beschreibung
Das Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 Proteinsynthese-Assay-Kit bietet eine schnelle, empfindliche und nicht-radioaktive Methode zum Nachweis der Proteinsynthese mittels Fluoreszenzmikroskopie oder High-Content-Bildgebung. In diesem Assay wird O-Propargyl-Puromycin (OPP) effizient in neu übersetzte Proteine in Methionin-haltigen Komplettmedien integriert und mit einem leuchtenden, photostabilen Alexa Fluor™ fluoreszierenden Farbstoff in einer schnellen, hochspezifischen und schonenden Klick-Reaktion markiert.Zu den Merkmalen dieses Kits zählen:
Das Kit enthält O-Propargyl-Puromycin (OPP), ein Alkinanalog von Puromycin (auch separat erhältlich), sowie Alexa Fluor™ 488 Picolylazid sowie alle für die Click-Reaktion benötigten Reagenzien. Das OPP wird kultivierten Zellen zugeführt und während der aktiven Proteinsynthese in Proteine integriert. Die Zugabe des Alexa Fluor™ 488 Picolylazids und der Click-Reaktionsreagenzien führt zu einer chemoselektiven Ligation oder „Click-Reaktion“ zwischen dem Picolylazid-Farbstoff und dem OPP-Alkin, wodurch die modifizierten Proteine durch eine bildbasierte Analyse nachgewiesen werden können.
Bei der Klick-Reaktion sind bioorthogonale (biologisch eindeutige) Anteile und fluoreszierend markierte proliferierende Zellen beteiligt. Die ermöglicht niedrige Hintergrundsignale und eine hohe Detektionsempfindlichkeit. Aufgrund der schonenden Reaktionsbedingungen eignen sich Click-iT™ Plus Assays zur Erkennung von Proteintranslationsereignissen bei gleichzeitiger Erhaltung der Zellmorphologie, der Bindung von fluoreszierend-markiertem Phalloidin und des Fluoreszenzsignals von GFP.
Anders als 35S-Methionin, das in herkömmlichen Methoden verwendet wird, handelt es sich um kein Aminosäure-Analogon. Daher kann es direkt zu Zellen in Komplettmedien hinzugefügt oder zur Bestimmung der Proteinsynthese in vivo verwendet werden.
Das Kit enthält alle Komponenten, die zur Markierung und Detektion des integrierten OPP in neu übersetzten Proteinen in Proben adhärenter Zellen erforderlich sind. Das Kit enthält ausreichend Reagenzien für die Markierung von 25 Deckgläsern von 18 mm × 18 mm Größe bei Verwendung von 1 ml Reaktionspuffer pro Test.
Spezifikation
| Weniger gefährlich | |
| 1 Kit | |
| Kennzeichnungsreagenz für naszide Proteine | |
| Alexa Fluor 488 |
| Proteinsynthese-Assay-Kit | |
| Dieses Kit enthält: Click-iT™ OPP-Reagenz, Alexa Fluor™ Picolylazid-Farbstoff, Click-iT™ OPP-Reaktionspuffer, Kupferschutzmittel, Click-iT™ Reaktionspuffer-Additiv, Click-iT™ Puffer zur Reaktionssteigerung und NuclearMask™ blauer Farbstoff. | |
| Click-iT™ |
Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.