PCR and qPCR
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Die Vorbereitung von Proben für PCR oder qPCR erfordert in der Regel die Extraktion und Reinigung von Zellkernmaterial. Je nach Probenquelle kann dies eine mechanische Manipulation durch Homogenisierung beinhalten oder die Verwendung von Harzen oder Beads zur Bindung der Nukleinsäuren vor der Aufreinigung erfordern. Bereiten Sie Ihre Proben mit Hilfe von DNA- und RNA-Extraktions-, Isolierungs- und Aufreinigungskits sowie Reagenzien, Puffern und mehr vor.
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Bei der Amplifikation werden ein DNA-Segment, Polymerase, Nukleotidlösung und Primer in einem PCR-Gefäß oder einer Mikroplatte kombiniert. Die folgenden Arbeitsschritte werden mit einem Thermocycler durchgeführt, wobei der Zyklus 35 bis 40 Mal wiederholt wird.
Denaturierung: Die Wasserstoffbrücken werden gebrochen, die DNA trennt sich.
Glühen: Primer und Polymerase binden sich an die DNA.
Erweiterung: Die Nukleotide paaren sich mit der DNA und bilden einen neuen komplementären Strang.
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Bei der Real-Time PCR wird die RNA in cDNA umgewandelt und dann mittels PCR amplifiziert. Gängige Real-Time PCR-Anwendungen weisen exprimierte Gene nach, untersuchen Transkriptvarianten und erstellen cDNA-Vorlagen für Klonierungs- und Sequenzierungsverfahren. Hier finden Sie Polymerasen, Oligonukleotide, Mastermixe und vieles mehr zur Unterstützung Ihrer Real-Time PCR-Assays.
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Die Real-Time PCR dient zum Nachweis spezifischer DNA-Sequenzen. Bei dieser Methode werden Fluoreszenzfarbstoffe oder Sonden verwendet, um die Menge des amplifizierten Materials in Ihrer Probe zu bestimmen. Hier finden Sie eine Vielzahl von Mastermixen sowie Real-Time PCR-Instrumente, Assays und Kits für die Quantifizierung Ihrer qPCR-Ergebnisse.
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Finden Sie geeignete, mit HEPA-Filtern ausgestattete PCR-Gehäuse, um kontaminierende Partikel aus Ihrem Arbeitsbereich fernzuhalten. Finden Sie PCR-Einweggefäße und -Gefäßstreifen, Nukleinsäure-Mikrotiterplatten, PCR-Gehäuse und andere Laborgeräte, die zertifiziert frei von DNAse, RNAse, DNA und anderen potenziellen Verunreinigungen sind.
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