In der Fixierungsphase wird ein Fixiermittel verwendet, um das Gewebe zu verändern, indem das Protein stabilisiert wird, so dass es gegen weitere Veränderungen resistent ist. Fixiermittel werden also verwendet, um das Gewebe vor dem Abbau zu schützen und die Struktur der Zellen zu erhalten, einschließlich subzellulärer Komponenten wie Zellorganellen (Kern, endoplasmatisches Retikulum und Mitochondrien). In der Aufbereitungsphase müssen die Gewebe einen Dehydratisierungsprozess durchlaufen, um Wasser durch das für die Einbettung verwendete Material zu ersetzen, damit die Gewebeproben am Einbettungsmaterial haften.
Die gebräuchlichste Technik ist die Paraffinwachseinbettung. Die Proben werden in Gewebekassetten eingelegt und dann in mehrere Bäder mit immer stärker konzentriertem Alkohol getaucht, um das Wasser aus dem Gewebe zu entfernen. Danach folgt ein Reinigungsmittel wie Xylol, um den Alkohol zu entfernen, und schließlich heißes, geschmolzenes Paraffinwachs, das das Xylol ersetzt und das Gewebe infiltriert.
Katalognummer 9397008
Katalognummer 8004920
Katalognummer 12655067
Bei der Einbettung werden die Gewebeproben in ihren Kassetten und das flüssige Einbettungsmaterial (z. B. Paraffin) in Formen eingelegt und aushärten gelassen. Die ausgehärteten Blöcke, die die Gewebeproben enthalten, sind dann zum Schneiden bereit. Die Einbettung kann auch mit gefrorenem, nicht fixiertem Gewebe in einem Medium auf Wasserbasis, in der Regel einem Glykol oder Harz auf Wasserbasis, erfolgen.
In der Schnittphase wird das Gewebe mit einem Mikrotom in sehr dünne Schnitte (3-5µm; 1000µm = 1mm) geschnitten. Diese Schnitte, die in der Regel dünner als die durchschnittliche Zelle sind, werden dann zur Färbung auf einen Glasträger gelegt. Gefrorenes Gewebe, das in ein Gefriermedium eingebettet ist, wird mit einem Mikrotom in einem Kryostaten geschnitten.
Katalognummer 121849
Katalognummer 15965451
Katalognummer 11572203
Routinefärbungen werden durchgeführt, um dem untersuchten Gewebe einen Kontrast zu verleihen. Hämatoxylin und Eosin (H und E) sind die in der Histologie am häufigsten verwendeten Färbemittel.
Hämatoxylin wird mit einem Metallbeizmittel, z. B. Aluminium, kombiniert, und der Hämatoxylin-Aluminium-Komplex wird verwendet, um Zellkerne blau/schwarz zu färben. Eosin ist die am häufigsten verwendete Gegenfärbung bei der Routinefärbung von Gewebeschnitten. Die beste Färbung mit Eosin erfolgt bei einem pH-Wert von 4,5 bis 5, und bei richtiger Anwendung lassen sich mehrere Rosatöne erzielen. Erythrozyten, Kollagen und das Zytoplasma von Epithel- oder Muskelzellen sollten bei Verwendung von Eosin in verschiedenen Rosatönen gefärbt werden. Nach der Färbung müssen die Schnitte zum Schutz des Präparats montiert werden, was die Verwendung von Eindeckmitteln und eines Deckglases erfordert.
Katalognummer 11968004
Katalognummer 15918206
In der Histologie müssen der Paraffin-Gewebeblock und der gefärbte Objektträger aufbewahrt werden. Fisher Scientific hat eine Reihe von Aufbewahrungsgeräten im Angebot.
Katalognummer 44890
Katalognummer 8000244
Katalognummer 6895024