Gelelektrophorese-Ausrüstung
Gelelektrophorese-Ausrüstung
Tankbaugruppen und -komponenten für Acrylamid, Agarose und IEF-Elektrophorese von Proteinen, Nukleinsäuren und Peptiden; dazu gehören Montage, Betrieb, Gelgießen, Trocknen, Wartung und Bildgebung von Komponenten, Ersatzteile und Zubehör.
Gelelektrophorese ist die bevorzugte Methode zur Trennung der Komponenten von Proben, die Nukleinsäure (DNA und RNA) und Proteinmakromoleküle enthalten.
Das Verfahren wird durchgeführt, indem die Probe an einem Ende eines Elektrophoresegels in kleine Wells oder Vertiefungen gelegt wird. Eine elektrische Quelle wird angeschlossen und läuft eine bestimmte Zeit lang. Ein Puffer liefert Ionen, die den Strom leiten und den pH-Wert aufrechterhalten.
Die Moleküle bewegen sich aufgrund der elektrischen Ladung. Proteine werden mit dem Detergens Natriumdodecylsulfat (SDS) vorbehandelt, um sie zu denaturieren und mit einer negativen Ladung zu versehen. Die Geschwindigkeit, mit der sich die Moleküle bewegen, ist umgekehrt proportional zur Größe oder Länge, und der Grad der Trennung (Abstand zwischen den Banden) hängt von der Gelkonzentration ab.
Zu den Trennungen gehören in der Regel Elektrophoresen (auch DNA-Leitern oder Proteinleitern genannt), die Moleküle bekannter Größe enthalten und zum Vergleich verwendet werden. Verschiedene Puffer und andere Elektrophoresereagenzien sind ebenfalls Teil des Prozesses.
Elektrophorese-Gele sind typischerweise Agarose oder Polyacrylamid; jedes ist für verschiedene Moleküle geeignet. Die Polyacrylamidgel-Elektrophorese (PAGE) wird in der Regel für Proteine und kleinere DNA-Fragmente verwendet. Polyacrylamid-Gele bilden sich durch chemische Reaktion und haben einheitliche Porengrößen. Sie können selbst gegossen oder als gebrauchsfertige oder vorgegossene Gele gekauft werden.
Agarose-Gele enthalten natürliche Polysaccharidpolymere aus Meeresalgen und haben unregelmäßige Porengrößen. Sie eignen sich gut für die Trennung von Proteinen, die größer als 200 kDa sind, oder von DNA-Fragmenten von 50 bis 20.000 bp. Es sind sowohl vorgegossene Agarose-Gele als auch Agarose-Gel in Pulverform zum Gießen vor Ort erhältlich.
Polyacrylamid-Gele werden in der Regel vertikal, Agarose-Gele dagegen horizontal gelagert. Vertikale und horizontale Elektrophoresegeräte sind weithin erhältlich, ebenso wie eine Vielzahl von Gießkammern und anderes Zubehör für Elektrophoresesysteme.
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