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Thermo Scientific™ ECO31I (BsaI) (10 U/l)
Das Restriktionsenzym Eco31I (BsaI) erkennt GGTCTC(1/5)^-Stellen und schneidet am besten bei 37°C im G-Puffer (Isoschizomere: BsaI, Bso31I, BspTNI).
Marke: Thermo Scientific™ ER0291
128.31 CHF gültig bis 2024-12-31
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Beschreibung
Lambda-DNA (dcm-) verdaut mit Eco31I (BsaI), 0,7 % Agarose, 2 Spaltstellen
Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.
5'...G G T C T C (N)1▵...3'
3'...C C A G A G (N)5▵...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität:
- 1x Puffer G:10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl2, 50 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA
- Bei 37°C inkubieren
Lagerungspuffer:
- Eco31I wird geliefert in:10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 25°C), 200 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Ligation und erneutes Schneiden:
- Nach 50-fachem Verdau mit Eco31I können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden
Methylierungseffekte:
- Dam: keine Überlappung – keine Auswirkung
- Dcm: möglicherweise Überlappung – Spaltung behindert
- CpG: möglicherweise Überlappung – Spaltung behindert
- EcoKI: keine Überlappung – keine Auswirkung
- EcoBI: möglicherweise Überlappung – Auswirkung unbestimmt
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
- Es sind mindestens 5 U der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich
Hinweis:
Mit Lambda-DNA (dcm-) (#SD0021) getestet, da einer der beiden Eco31I-Erkennungsstellen in Lambda-DNA schwer zu spalten ist. Die Spaltung mit Eco31I wird durch überlappende dcm-Methylierung behindert. Verwenden Sie zur Vermeidung von dcm-Methylierung einen dam- oder dcm-Stamm wie z. B. GM2163 (Nr. M0099). Eine geringe Salzkonzentration, eine hohe Glycerin-Konzentration (>5 %), ein pH-Wert von >8,0 oder ein hoher Enzymüberschuss können zu Star-Aktivität führen. Eco31I spaltet flussabwärts von seinem Erkennungsort und kann jede gewünschte 4-Base-5'-Überhänge generieren. Diese Funktion ist für das direkte Klonen von PCR-Produkten nützlich.
Spezifikation
10 U/μl | |
Eco31I (BsaI) | |
Ja | |
Ja | |
Restriktionsenzym |
Empfindlich für CpG-Methylierung, nicht empfindlich für CpG-Methylierung und Dam-Methylierung, nicht empfindlich für CpG-Methylierung und Dam-Methylierung, Not Dam Methylation-Sensitive | |
10x Puffer G | |
37°C | |
1000 E | |
Narbenloses Klonen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.