Invitrogen™ Topo™ TA Cloning™ Kit für die Sequenzierung, ohne kompetente Zellen

Beschreibung

Jedes Kit verwendet den pCR™4-TOPO TA-Vektor mit spezieller Sequenzierung der Primerstellen, die bei jeder Reaktion mehr Insert-Sequenz und weniger Vektorsequenz ergeben; sie sind je nach Ihren Anforderungen und Ihrem Budget mit einer Vielzahl von kompetenten Zellen oder ohne kompetente Zellen erhältlich. Diese Kits enthalten alles Notwendige zur Klonierung und Selektion rekombinanter Vektoren, die das PCR-Fragment Ihrer Wahl enthalten.

TOPO TA-Klonierungs-Kits für die Sequenzierung: Übersicht
Vektor: pCR4-TOPO TA-Vektor: Optimierter Klonierungsvektor für verbesserte Sequenzierungsergebnisse
Klonierungsmethode: TOPO™ TA Cloning™: Ligation von PCR-Produkten auf Basis von Topoisomerase I in 5 Minuten mit 3'A-Überhängen (Taq-amplifiziert) zum Vektor
Kompetente Zellen: Verschiedene Optionen: Wählen Sie unter den Kits mit allgemeinen, hocheffizienten, bakteriophagen T1-beständigen oder schnell wachsenden kompetenten Zellen oder verwenden Sie Ihr eigenes
pCR4-TOPO TA-Vektor: Optimiert zur SequenzierungEin Großteil der multiplen Klonierungsstellen wurde vom pCR4-TOPO TA-Vektor entfernt, um den Abstand zwischen Sequenzierprimer- und Insert-Stelle auf maximal 33 bp zu verkürzen. Dies bedeutet, dass Sequenzierreaktionen weniger Vektorsequenz und mehr Insertsequenz ergeben. Der pCR4-TOPO TA-Vektor bietet Bindungsstellen für 4 Standard-Sequenzierungsprimer: M13 forward, M13 reverse, T7 und T3. Davon enthalten die Kits je einen Aliquot.
pCR4-TOPO TA-Klon-Selektion und -Manipulation
Der pCR4-TOPO TA-Vektor enthält Ampicillin- und Kanamycin-Resistenzmarker und eine LacZα-ccdB-Genfusion für die Positivselektion und das Blau-Weiß-Screening. Die minimierte multiple Klonierungsstelle des Vektors umfasst abgrenzende EcoRI-Schnittstellen für eine vereinfachte Exzision klonierter PCR-Produkte und eine einzigartige Sse8387I-Stelle für Nested Deletions vor der Sequenzierung. T7- und T3-Promoter sind auch für die In-vitro-Transkription vorhanden.
Vereinfachte TOPO basierte Klonierung
Mit dem TOPO Verfahren sind für die Klonierung weder PCR-Primer mit spezifischen integrierten Sequenzen, noch Post-PCR-Verfahren, eine Vektorpräparation oder andere zeitintensive Schritte zur DNA-Manipulation erforderlich. Geben Sie Ihre PCR-Reaktion einfach zum mitgelieferten Vektor mit gebundener Topoisomerase, warten Sie 5 Minuten, und führen Sie die Transformation in kompetente E. coli-Zellen durch.
Effiziente Klonierung
Mit bis zu 95 % der Klone, die das gewünschte Insert tragen, können Sie das Screening der Klone reduzieren und somit Zeit und Geld sparen. Der in diesem Kit verwendete pCR4-TOPO TA-Vektor enthält 3'T-Überhänge für eine effiziente Ligation von Taq-amplifizierten PCR-Produkten mit 3'A-Überhängen.
Der Standard für die Klonierung
Seit über zehn Jahren verlassen sich Tausende Wissenschaftler bei der Klonierung auf das TOPO Verfahren. Die schnelle, einfache und effiziente TOPO Klonierung kam bereits bei einer Vielzahl von Vektoren und in unterschiedlichsten Anwendungen zum Einsatz.
TOPO TA Cloning Kits für die Sequenzierung: Kit-Optionen
Das TOPO TA Cloning Kit für die Sequenzierung ist mit einer Vielfalt kompetenter Zellen erhältlich, die verschiedene Vorteile entsprechend Ihren Anforderungen bieten:

• Allgemeine Klonierung: TOP10 (Kat.-Nr. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Hocheffiziente Klonierung: TOP10 Electrocomp™ Zellen (Kat.-Nr. K4580-01, K4580-40)
• Klonierung allgemein, Resistenz gegen Bakteriophagen T1: DH5α-T1R (Kat.-Nr. K4595-01, K4595-40)
• Schnelles Wachstum: Mach1™-T1R chemisch kompetente E. coli (Kat.-Nr. K4530-20)
• Stellen Sie Ihre eigenen Zellen bereit: Mehr Flexibilität und Kosteneffizienz (Kat.-Nr. 450030)

Eine Version des Kits umfasst ein PureLink™ Quick Plasmid-Miniprep-Kit (Bestell- Nr. K4575-02) für die Isolierung von sauberem, sequenzbereiten, rekombinanten Plasmid und ist ebenfalls erhältlich.

• Resistent gegen Ampicillin (AMPR) und Kanamycin (KanR)
• Mehr Sequenz: Ermöglicht mehr Insertsequenz und weniger Vektorsequenz bei der Verwendung von Standard-Sequenzierungs-Primern
• Schnell und praktisch: Von der PCR zum Klon in nur drei Schritten und 5 Minuten
• Effizient: Bis zu 95 % der Klone mit dem korrekten Insert
• Bewährt: Zuverlässige Leistung seit über einem Jahrzehnt mit über 4.000 Referenzen

Klonierung, PCR-Klonierung

Bestellinformation

Versandbedingung: Trockeneis