Primärantikörper – Immunglobuline, die an bestimmte Proteine oder andere Biomoleküle binden – werden bei vielen Forschungsanwendungen und Protokollen zum Nachweis von Zielen verwendet. Sie werden unter Verwendung verschiedener Wirtstiere entwickelt, darunter Mäuse, Ratten, Kaninchen, Ziegen, Schafe und viele andere.

Monoklonale und polyklonale Antikörper

Eine Art von Primärantikörpern, die so genannten monoklonale Antikörper, bietet eine hohe Reproduzierbarkeit sowie geringe Kreuzreaktivität und geringes Hintergrundrauschen. Ein anderer Typ, die so genannten polyklonalen Antikörper, kostet oft weniger und bietet eine höhere Affinität und schnellere Bindung. Beide werden unter Verwendung von Plasma-B-Zellen hergestellt, erstere verwenden jedoch denselben Klon und letztere verwenden unterschiedliche Klone. Monoklonale Antikörper erfordern Hybridomzelllinien, polyklonale Antikörper hingegen nicht.

Es gibt auch rekombinante monoklonale Antikörper mit ähnlichen Vorteilen, wie hoher Affinität, Skalierbarkeit und Spezifität. Sie werden mithilfe von In-vitro-Klonierung von Plasma-B-Zellen und Expressionswirten hergestellt.

Konjugierte Primärantikörper

Antikörper können mit verschiedenen Fluorophoren oder Detektionsmitteln markiert oder ohne Markierungen verwendet werden. Markierte Primärantikörper, auch konjugierte Primärantikörper genannt, helfen Forschern, ihre Anwendungen zu vereinfachen und zu optimieren. Sie werden mit gängigen Enzymen und Farbstoffen wie Alexa Fluor gekoppelt und häufig bei der Protein- und Zellanalyse verwendet.

Anwendungen

Antikörper für Life-Science-Anwendungen werden bei der Durchflusszytometrie, Western Blotting, ELISA, Immunhistochemie und Immunozytochemie eingesetzt. Sekundärantikörper können hinzugefügt werden, um den Nachweis und die Aufreinigung bestimmter Antigene zu unterstützen. Sie binden an den primären Antikörper, der an das Antigen von Interesse bindet. Das Auffinden der richtigen Kombination von Antikörpern kann zu einer größeren Antigenspezifität und einem starken, nachweisbaren Signal führen.