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Invitrogen™ SuperScript™ IV System für Erststrangsynthese

Optimiert für die Synthese von Erststrang-cDNA aus gereinigter Poly(A)+- oder aus Gesamt-RNA.

Marke:  Invitrogen™ 18091300

1641.50 CHF gültig bis 2024-12-20
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Artikelnummer. 16272082

  • 2345.00 CHF / 200 Tests
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Beschreibung

Beschreibung

Optimiert für die Synthese von Erststrang-cDNA aus gereinigter Poly(A)+- oder aus Gesamt-RNA.

  • Kit enthält Superscript IV Reverse Transkriptase (RT), einen firmeneigenen MMLV-Mutanten mit robuster und zuverlässiger cDNA-Synthese in RT-Reaktionen, und ezDNase zum Entfernen potenzieller genomischer DNA-Kontamination.
  • Das System wurde gegenüber dem SuperScript III-basierten System im Hinblick auf Hemmstoff-Resistenz, Aktivität und Reaktionsgeschwindigkeit deutlich verbessert, wobei gleichzeitig alle Vorteile des Vorgängersystems erhalten blieben, einschließlich erhöhter Thermostabilität, hocheffizienter Volllängen-cDNA-Synthese und reduzierter RNase-Aktivität.
  • Sorgt für eine zuverlässige, gleichbleibende und schnelle cDNA-Synthese in Gegenwart von Inhibitoren, die in einer Vielzahl von Proben dazu führen, dass andere aktuell verfügbare RTs nur ineffizient agieren.
  • Enthält alle erforderlichen Komponenten für eine RT-Reaktion, ein zusätzliches Kontrollgen und Primer, und ermöglicht die flexible Anpassung des Verfahrens.
  • EzDNase zum Entfernen genomischer DNA ist enthalten.
  • Das vereinfachte Entfernen genomischer DNA verkürzt das gesamte Reverse-Transkriptionsprotokoll drastisch und reduziert mögliche Abweichungen bei der Genexpression aufgrund von RNA-Verlusten oder -Schäden während der konventionellen DNase-Behandlung.
  • Ist ideal, wenn Reproduzierbarkeit und Zuverlässigkeit der Ergebnisse von entscheidender Bedeutung sind, und wenn Hemmstoffe in der RNA-Probe die cDNA-Synthese stören und zu Verzerrungen in Genexpressionsstudien führen könnten.
  • Verbesserte Resistenz gegen eine Vielzahl von Inhibitoren, die die cDNA-Synthese beeinträchtigen können
  • Robuste und spezifische cDNA-Synthese für ein breites Spektrum von Probentypen
  • Schnellere reverse Transkriptase-Reaktion, welche die Inkubationszeit von > 50 min auf 15 min reduziert, mit einfachem Verfahren zum Entfernen von genomischer DNA

 

Enzymquelle
Gewonnen durch Expression des pol-Gens von M-MLV in E. coli und für eine erhöhte Thermostabilität, Halbwertszeit, Prozessivität und Inhibitorresistenz sowie reduzierte RNase H-Aktivität modifiziert.

Wirkungs- und Qualitätskontrolle
Endodesoxyribonuklease-, Exodesoxyribonuklease- und Ribonuklease-Assays sowie Ausbeute und Länge des cDNA-Produkts.

Definition einer Einheit
Eine Einheit von SuperScript IV RT entspricht der Enzymmenge, die benötigt wird, um in 10 min bei 37 °C mit Poly(A)-Oligo(dT)12 – 18 als Template/Primer 1 nmol Desoxyribonukleotid in säurefällbares Material einzubauen.

Reaktionsbedingungen der Einheit
50 mM Tris-HCl (pH 8,3), 4 mM MgCl2, 10 mM DTT, 50 mM KCl, 0,5 mM dTTP, 0,4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0,4 mM Poly(A)-Oligo(dT)12 – 18 und Enzym in 20 μl für 10 min bei 37 °C

TRUSTED_SUSTAINABILITY
Spezifikation

Spezifikation

• Oligo(dT)20, 4 x 50 μl (50 μM)
• Random Hexamer, 4 x 250 μl (50 ng/μl)
• 5x RT-Puffer, 4 x 1 ml
• DTT, 4 x 250 μl (0,1 M)
• dNTP-Mix, 250 μl (10 mM)
• Superscript IV RT, 4 x 50 μl (Insgesamt 10.000 Einheiten bei 200 U/μl)
• Ribonuklease Inhibitor, 4 x 100 μl (40 U/μl)
E. coli RNase H, 4 x 50 μl (2 U/μl)
• DEPC-behandeltes Wasser, 4 x 1,2 ml
• HeLa RNA insgesamt, 4 x 20 μl (10 ng/μl)
• Sense Control Primer, 4 x 25 μl (10 μM)
•Antisense-Kontrollprimer, 4 x 25 μl (10 μM)
• ezDNase Enzym, 4 x 50 μl
• 10x ezDNase Puffer, 4 x 100 μl
• Nukleasefreies Wasser, 4 x 1,25 ml

Lagerung bei –30 bis –5 °C.

Hoch
Reverse Transkription
SuperScript IV
200 Reaktionen
Reverse Transkription
RNA
Kit
10 min
50 °C
cDNA (Erststrang)
Separate Komponenten
Bis 12,3 kb
Kit with ezDNase
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Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.