The error rate of Phusion DNA Polymerase in HF Buffer (4.4 x 10-7) is lower than that in GC Buffer (9.5 x 10-7). Therefore, the HF Buffer should be used as the default buffer for high-fidelity amplification. However, GC Buffer can improve the performance of Phusion DNA Polymerase on some difficult or long templates, such as GC-rich templates or those with complex secondary structures. For applications such as microarray or DHPLC, where the DNA templates need to be free of detergents, we recommend using detergent-free reaction buffers.
GC-Puffer für Phusion DNA-Polymerasen
Für Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen sind zwei optimierte Puffer verfügbar: 5x Phusion HF-Puffer und 5x Phusion GC-Puffer. Die Fehlerrate der Phusion DNA-Polymerase in HF-Puffer (4,4 × 10-7) ist geringer als in GC-Puffer (9,5 × 10-7). Der HF-Puffer sollte deshalb standardmäßig bei High-Fidelity-Amplifikationen eingesetzt werden. An schwierigen oder langen Templates, wie GC-angereicherten, bzw. Templates mit komplexen sekundären Strukturen, kann der GC-Puffer die Leistungsfähigkeit von Phusion DNA-Polymerase verbessern. Für Anwendungen wie Microarray oder DHPLC, bei denen die DNA-Templates frei von Detergenzien sein müssen, empfehlen wir die Verwendung von Reaktionspuffern ohne Detergenzien.
Die 5x Phusion Green Puffer enthalten ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe für das direkte Laden von PCR-Produkten auf ein Gel. Farbpuffer haben keine Auswirkungen auf die Enzymleistung und sind mit nachgeschalteten Anwendungen wie der DNA-Sequenzierung, Ligation und Restriktionsverdauung kompatibel.
Für Thermo Scientific Phusion High-Fidelity DNA-Polymerasen sind zwei optimierte Puffer verfügbar: 5x Phusion HF-Puffer und 5x Phusion GC-Puffer. Die Fehlerrate der Phusion DNA-Polymerase in HF-Puffer (4,4 × 10-7) ist geringer als in GC-Puffer (9,5 × 10-7). Der HF-Puffer sollte deshalb standardmäßig bei High-Fidelity-Amplifikationen eingesetzt werden. An schwierigen oder langen Templates, wie GC-angereicherten, bzw. Templates mit komplexen sekundären Strukturen, kann der GC-Puffer die Leistungsfähigkeit von Phusion DNA-Polymerase verbessern. Für Anwendungen wie Microarray oder DHPLC, bei denen die DNA-Templates tensidfrei sein müssen, empfehlen wir die Verwendung von tensidfreien Reaktionspuffern. Die 5x Phusion Green Puffer enthalten ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe zum direkten Auftragen von PCR-Produkten auf ein Gel. Farbpuffer haben keine Auswirkungen auf die Enzymleistung und sind mit nachgeschalteten Anwendungen wie der DNA-Sequenzierung, Ligation und Restriktionsverdau kompatibel.
Enthält Phusion HF-Puffer-Pack (F-518):
5X Phusion HF-Puffer (1X Puffer ergibt 1,5 mM MgCl2)
50 mM MgCl2
DMSO
Phusion GC-Pufferpaket (F-519):
5 x Phusion GC-Puffer (1 x Puffer ergibt 1,5 mM MgCl2)
50 mM MgCl2
DMSO
Phusion Green HF-Puffer-Pack (F-538L):
5 x Phusion Green HF-Puffer (1 x Puffer ergibt 1,5 mM MgCl2)
50 mM MgCl2
DMSO
Phusion Green GC-Puffer-Pack (F-539L):
5 x Phusion Green GC-Puffer (1 x Puffer ergibt 1,5 mM MgCl2)
50 mM MgCl2
DMSO
Phusion HF-Puffer-Pack, detergensfrei (F-520):
5 x Tensid-freier Phusion HF-Puffer (1 x Puffer ergibt 1,5 mM MgCl2)
50 mM MgCl2
DMSO
Phusion GC-Puffer-Pack, detergensfrei (F-521):
5 x Tensid-freier Phusion GC-Puffer (1 x Puffer ergibt 1,5 mM MgCl2)
