Thermo Scientific™ Pierce™ Antibody Biotinylation Kit for IP

Beschreibung

Die Reagenzien für das Pierce Antikörper-Biotinylierungs-Kit wurden für Biotin-markierte Antikörper für IP- und Co-IP-Reaktionen optimiert und validiert. Die Bestimmung der optimalen Anzahl der Biotine, die an das Zielmolekül binden sollen, ist eine der größten Herausforderungen der Biotinylierung. Bei IP- und Co-IP-Anwendungen führt eine zu hohe Anzahl von Biotinen zur reduzierten Affinität für das Ziel-Antigen, während zu wenige Biotine zum Auslaugen der Antikörper nach der Elution des Ziel-Antigens führen. Der Biotin-Markierungsvorgang beim Pierce Antikörper-Biotinylierungs-Kit für IP wurde für diese Herausforderung entwickelt.

Das Thermo Scientific™ Pierce™ Antikörper-Biotinylierungs-Kit für IP bietet Biotinylierungs-Reagenzien speziell für die Markierung von primären Antikörpern in Immunpräzipitations-Anwendungen.

• Optimiert für IP – Reagenzien und Protokolle, die speziell für Antikörpermarkierungen in Immunpräzipitationsanwendungen entwickelt wurden
• Anwenderfreundlich – die Kitkonfiguration wurde speziell für 50 bis 200 μg Antikörper in einer 100 μl-Reaktion optimiert; Entsalzungssäulen werden zum Entfernen überschüssiger Biotinylierungsreagenz nach der Markierung bereitgestellt
• Amin-reaktiv – reagiert mit primären Aminen (-NH2) von Antikörpern
• Erhöhte Löslichkeit – Pegylierung verbessert die Wasserlöslichkeit des biotinylierten Antikörpers und verhindert die Aggregation bei Lagerung
• Reduzierte sterische Hinderung – längerer Spacerarm (29 Ångström) minimiert die sterische Hinderung bei Bindung an Avidin-Moleküle

Das Kit enthält genügend Reagenzien zum Markieren von 50 bis 200 μg Antikörper in 100 μl-Reaktionsvolumen für acht Proben. Das NHS-PEG4-Biotin-Markierungsreagenz enthält eine aminreaktive N-Hydroxysuccinimidester (NHS)-Gruppe und einen wasserlöslichen PEG4-Spacer für die optimale Markierung und wird in anwenderfreundlichen Einweg-Mikroröhrchen geliefert. Sowohl die Markierungseffizienz des Biotinylierungsreagenz als auch die Bindungsaffinität der markierten Antikörper wurden unter Anwendung von monoklonalen Maus- (IgG1, IgG2), polyklonalen Kaninchen- und monoklonalen Kaninchen-Antikörpern validiert. Zeba™ Entsalzungs-Spin-Säulen dienen der einfachen und effizienten Entfernung von Salzen und überschüssigem Biotin.

Anwendungen:

• IP- und Co-IP
• IP und Co-IP für Massenspektrometrie-Anwendungen
• Antikörper-Anhaftung an Streptavidin-Agarose und magnetische Träger