Thermo Scientific™ Pierce™ MS-Compatible Magnetic IP Kits

Beschreibung

Die Immunpräzipitation ist häufig für den Nachweis und die Quantifizierung von Proteinen mit geringer Abundanz oder seltenen Signalereignissen erforderlich. Die massenspektrometrische Analyse basiert auf zwei Methoden für den Nachweis von Proteinen mit geringer Abundanz: Single Reaction Monitoring (SRM) und Parallel Reaction Monitoring (PRM), die Isolierung, Planung und Quantifizierung ausgewählter proteotypischer Peptide ermöglichen. Diese IP-Kits wurden für eine effiziente Immunpräzipitation und Co-Immunpräzipitation von Target-Proteinen optimiert und sind direkt mit der nachgelagerten MS-Probenvorbereitung und -analyse kompatibel.

• MS-kompatibel:—Reagenzien sind direkt mit Peptidverdau innerhalb der Lösung kompatibel
• Empfindlich:—Bei dem Verfahren werden erfolgreich auch niedrig abundante Proteine angereichert (niedriger ng-Bereich)
• Geringes Hintergrundsignal:—Angereicherte Proben enthalten minimale Detergenzienreste
• Reduzierte Antikörperkontamination:—Antikörperbiotinylierung mit Streptavidin-Anreicherung reduziert die Kontamination im Eluat im Vergleich zu anderen IP-Methoden
• Robust:—Verfahren und Reagenzien wurden mit zahlreichen Targets verifiziert, was eine konsistente Anreicherung von niedrig konzentrierten Proteinen (ng-Bereich) mit mindestens zwei Peptiden pro Protein sichert

Das Thermo Scientific Pierce MS-kompatible Magnet-IP-Kit (Protein A/G) nutzt hochwertige Pierce Protein A/G Magnetbeads, was eine größere Flexibilität bei der Antikörperaufnahme bietet als Protein A oder G allein. Das Thermo Scientific Pierce MS-kompatible Magnet-IP-Kit (Streptavidin) nutzt hochwertige Pierce Streptavidin-Magnetbeads zur Verwendung mit biotinylierten Antikörpern, die kommerziell erworben oder mit dem Pierce AntikörperBiotin-Kit für IP markiert werden können. Nach dem Immunpräzipitationsverfahren ist die mit dem Ziel angereicherte Elutionsfraktion bereit für den tryptischen Verdau in der Lösung ohne Gelreinigung, Detergensentfernung oder Entsalzung. Darüber hinaus wurden die Reagenzien und Verfahren sowohl mit manueller als auch mit automatisierter Magnettrennung validiert.

Anwendungen
• Anreichern von Targets mit geringer Abundanz zur Verbesserung der MS-Empfindlichkeit
• Identifizieren von Target-Proteinen, die mit dem Westernblot-Verfahren nicht nachweisbar sind
• Quantifizieren von Target-Proteinen durch LC-MS-Analyse
• Screening von Antikörpern für IP-MS