Sartorius Microsart™ ATMP Mykoplasma

Beschreibung

Ein schneller Nachweis von Mykoplasmen-Kontaminationen in Arzneimitteln für neuartige Therapien (ATMP, Advanced Therapy Medicinal Products) ist von großer Bedeutung. Mit dem Microsart™ ATMP Mykoplasma kann die Testzeit von Wochen auf nur drei Stunden verkürzt werden. Darüber hinaus verleiht die TaqMan™ Sonde dem PCR-System eine hohe Spezifität und minimiert die Interpretationsbreite von Ergebnissen. Das Microsart™ ATMP Mykoplasma wurde entsprechend EP 2.6.7 in Kombination mit EP 2.6.21 hinsichtlich der Nachweisgrenze für alle aufgeführten Mycoplasmen-Spezies, Spezifität und Robustheit für autologe Zelltransplantate (z. B. Chondrozyten) in wirksamer Weise validiert.

Efficient Applications Mykoplasma findet sich in nahezu allen Zellkultureinrichtungen und Gewebekulturlaboren. Es wird geschätzt, dass Mykoplasmen für bis zu 60 % der Konaminationen von Zellkulturen verantwortlich ist. Das Microsart™ ATMP Mykoplasma Echtzeit-PCR-Kit ist speziell auf Krankenhäuser, Institutionen und Unternehmen ausgelegt, die in das Testen auf Mykoplasmen-Kontaminationen gemäß EP 2.6.7 in zellbasierten Therapeutika involviert sind. Das Kit kann zur direkten Detektion von Mollicutes (Mykoplasma, Acholeplasma, Spiroplasma) in Zellkulturen und aus Zellkulturen abgeleiteten biologischen Substanzen, ATMPS, verwendet werden.

High-Performance-Mykoplasma wird explizit durch Amplifikation eines hoch konservierten rRNA-Operons, oder genauer, einer 16S rRNA-Kodierungsregion im Mykoplasma-Genom nachgewiesen. Die Mykoplasma-spezifische Amplifikation wird bei 520 nm (FAM™ Kanal) nachgewiesen. Das Kit besteht aus einem gebrauchsfertigen Mastermix mit Polymerase, Primern und FAM™ und ROX™ markierten Sonden, die den spezifischen Nachweis von Mollicutes-Spezies ermöglichen, und einer internen Kontrolle. Eine Nachweisgrenze von weniger als 10 CFU/ml für alle im Europäischen Arzneibuch genannten Mykoplasma-Spezies erfüllt die Vorgaben zu Empfindlichkeit, Spezifität und Robustheit.

Kontaminationsschutz Das Kit enthält dUTP anstelle von dTTP, sodass die Möglichkeit zur Degradation von Amplikonen aus früheren Analysen mittels Uracil-DNA-Glykosylase (UNG) besteht. Dadurch können falsch-positive Ergebnisse auf einem Minimum gehalten werden. UNG ist nicht im Kit enthalten. Die interne Amplifikationskontrolle erkennt falsch-negative Ergebnisse aufgrund von PCR-Inhibitoren oder unsachgemäßer DNA-Extraktion. Die interne Kontroll-DNA kann direkt zum PCR-Mastermix hinzugefügt werden, um als PCR-Kontrolle zu fungieren oder um den Extraktionsprozess zu überwachen. Die Amplifikation der internen Kontrolle wird bei 610 nm (ROX™ Kanal) erkannt. Bei Verwendung von Uracil-DNA-Glykosylase (UNG) enthält das Kit dUTP anstelle von dTTP zur Degradation von Amplikonen aus früheren Analyse mittels Uracil-DNA-Glykosylase (UNG). Dadurch werden falsch-positive Ergebnisse minimiert.