Invitrogen™ LentiArray™ Human Phosphatase CRISPR Library

Beschreibung

Die ausgezeichnete Invitrogen™ LentiArray™ Human Phosphatase-Bibliothek zielt auf 288 Gene mit bis zu 4 gRNA pro Genziel (in einem einzigen Well zusammengefasst) für insgesamt 1.152 gRNAs ab. Bibliotheken werden mit einem durchschnittlichen Titer von 1 x 10⁸ TU/ml (funktionaler Titer, der durch Antibiotikaresistenz bestimmt wird) mit 100 μl gebrauchsfertigen lentiviralen Partikeln pro Genziel geliefert.

Die reversible Phosphorylierung ist ein zentraler regulatorischer Prozess in Signaltransduktionswegen. Phosphatasen dephosphorylieren ihre Zielproteine, sind integraler Bestandteil der Regulation von Signalwegen und werden zunehmend als potenzielle therapeutische Ziele analysiert. Die Genziele dieser Bibliothek wurden unter Verwendung der aktuellsten Genomdatenbanken, einschließlich der NCBI RefSeq-Datenbank, ausgewäglt und verweisen auf die Gene Ontology Consortium (GO)-Datenbank und/oder das HUGO Gene Nomenclature Committee (HGNC).

Für Ihren Erfolg erdacht
LentiArray CRISPR-Bibliotheken sind mit gRNA-Designs erstellt, die mit dem proprietären CRISPR gRNA-Designalgorithmus von Thermo Fisher Scientific hergestellt wurden. Dieser Algorithmus umfasst die neueste gRNA-Designforschung sowie unsere umfangreiche Erfahrung im eigenen Unternehmen, um Designs höchster Qualität zu erstellen. Die in den LentiArray CRISPR-Bibliotheken enthaltenen gRNA-Designs werden für maximale Bearbeitungseffizienz und Spezifität ausgewählt und sind so konzipiert, dass alle bekannten Isoformen des Zielgens herausgeknockt werden. Für jedes Genziel sind bis zu vier hochwertige gRNAs enthalten, um ein hocheffizientes Knockout des Zielgens in einer Vielzahl von Zelltypen zu gewährleisten.

Entwerfen und führen Sie Ihre Experimente ohne Einschränkungen durch
LentiArray CRISPR-Bibliotheken wurden entwickelt und konstruiert, um Ihnen vollständige Kontrolle über Ihr experimentelles Design zu geben. Verwendet wird ein Zwei-Vektor-Design, das die Cas9-Nuklease und die gRNA aus separaten lentiviralen Konstrukten exprimiert, sodass Sie bestimmen können, wann und wie die Genombearbeitungswerkzeuge an Ihre Zellen abgegeben werden.

Das LentiArray Cas9-Lentivirus-Konstrukt exprimiert eine humane, codon-optimierte Cas9-Nuclease mit einem Blasticidin-Resistenz-Gen unter der Kontrolle des EF-1α (EFS)-Promotors. Sie können Ihre Zellen sowohl mit den LentiArray gRNA-Lentiviren als auch mit dem Cas9-Lentivirus oder nur mit dem LentiArray Cas9-Lentivirus koinfizieren, um eine stabile Cas9-exprimierende Zelllinie herzustellen. Die LentiArray CRISPR-Bibliotheken bieten Ihnen die Freiheit, den experimentellen Ansatz zu entwerfen, der am besten zu Ihrem Modellsystem und Ihren Screening-Zielen passt.

Außerdem enthalten die gRNA-Lentiviren, aus denen die LentiArray CRISPR-Bibliotheken bestehen, keine fluoreszierenden Marker, sodass Ihre experimentellen Designs keinen Einschränkungen unterliegen. Dadurch können Reporter jeder Wellenlänge mit den Bibliotheken verwendet werden und Ihre Fähigkeit, Multiplex-Experimente durchzuführen, wird erweitert. Für anspruchsvolle Zelllinien enthalten die LentiArray-gRNA-Linsen ein Puromycin-Resistenzgen, das eine Anreicherung der Population der bearbeiteten Zellen ermöglicht und stärkere Phänotypen antreibt.

Optimieren Sie Ihr Assay-Design und haben Sie volles Vertrauen in Ihre Ergebnisse mit LentiArray-Kontrollen
Hohe Qualitätskontrollen sind der Eckpfeiler eines erfolgreichen Screenings. Die Produktlinie der LentiArray CRISPR-Bibliotheken umfasst eine Reihe von Kontrollen, die Ihnen bei der schnellen Entwicklung Ihres Assays helfen und Ihnen bei der Definition Ihrer Trefferkriterien Sicherheit geben.