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Invitrogen™ GeneRacer™ Kit with SuperScript™ III RT and TOPO TA Cloning™ Kit for Sequencing

Gewährleistet die Amplifikation von Transkripten in ausschließlich voller Länge, indem abgeschnittene Botschaften aus dem Amplifikationsprozess entfernt werden

Marke:  Invitrogen™ L150201

1439.44 CHF gültig bis 2024-12-31
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Artikelnummer. 10093232

  • 1894.00 CHF / 5 Milliliter
Verfügbar ab: 22-01-2025
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Beschreibung

Beschreibung

Das GeneRacer Kit bietet eine Methode zur Gewinnung von 5'- und 3'-Enden der cDNA in voller Länge anhand einer bekannten cDNA-Sequenz aus exprimierten Sequenzteilstücken (ESTs), subtrahierter cDNA, Differentialanzeige oder Bibliothekssuche. RACE PCR-Produkte können einfach und schnell kloniert werden: entweder mit dem Zero Blunt TOPO PCR Klonierungskit für die Sequenzierung (stumpfendige PCR-Produkte) oder mit dem TOPO TA Klonierungskit für die Sequenzierung (PCR-Produkte mit 3' A-Überhängen). Anhand der bereitgestellten Protokolle lassen sich die cDNA-Enden von seltenen (30 Kopien/Zelle) und langen (9 KB) Transkripten amplifizieren und ab 1 μg Gesamt-RNA sequenzieren.

  • Generierung von cDNA aus Transkripten mit mindestens 10 kb Länge
  • Gewinnung des Volllängen-5'-Endes von seltenen Transkripten mit weniger als 30 Kopien pro Zelle
  • Klonierung der 5'- und 3'-Enden in voller Länge, um eine vollständige cDNA-Sequenz zu erhalten

Klonierung, PCR und Echtzeit-PCR, Reverse Transkription, cDNA-Bibliotheken und Bibliotheksaufbau

Bestellinformation

Versandbedingung: Trockeneis

TRUSTED_SUSTAINABILITY
Spezifikation

Spezifikation

TOP10
Jedes Modul wie angegeben lagern:

GeneRacer™ Modul (-20 °C):

• 2 × 1,5 ml steriles Wasser

• 24 µl RNaseOut™

• je 6 µl CIP (Calf Intestinalphosphatase), CIP-Puffer, TAP (Tabak-Säure-Pyrophosphatase), 10X TAP-Puffer, T4-RNA-Ligase, 10X T4-RNA-Ligase-Puffer und 10 mM ATP

• 6 × 250 ng GeneRacer™ RNA Oligo

• 2 × 1 ml Phenol/Chloroform

• 36 µl Muschelglykogen

• 200 µl Natriumacetat (3 M)

• je 225 µl GeneRacer™ 5′ Primer, 5′ Nested-Primer, 3′ Primer und 3′ Nested-Primer

• 20 µl Kontroll-RNA (HeLa Gesamt-RNA, 500 ng/µl)

• je 15 µl Kontroll-Primer A und Kontroll-Primer B.1

SuperScript™ III RT Modul (-20 °C)

• 6 µl SuperScript™ III Reverse Transkriptase (200 U/µl)

• 24 µl 5X Erststrang-Puffer

• 15 µl DTT (0,1 M)

• 6 µl RNaseH (2 U/µl)

• 6 µl Random-Primer (100 ng/µl)

• 6 µl GeneRacer™ Oligo dT-Primer (900 ng/µl)

• 6 µl dNTP Mix (je 10 mM)

10 S.N.A.P.™ Säulen (Raumtemperatur)

TOPO TA Cloning™ Kit für die Sequenzierung (-20 °C)

• Ausreichend Reagenzien und One Shot™ TOP10 chemisch kompetente E. coli (bei -80 °C lagern) zur Klonierung von 10 GeneRacer™ PCR-Produkten; GeneRacer Modul (-20 °C), SuperScript III RT Modul (-20 °C), kompetente E. coli (bei -80 °C lagern), S.N.A.P. Säulen (Raumtemperatur), TOPO TA Klonierungskit für die Sequenzierung (-20 °C)
Reverse Transkription
GeneRacer™, SuperScript™, TA Cloning™, TOPO™
1 Kit
TOPO, TA
Kit
GeneRacer Modul: 2 x 1, ml steriles Wasser, 24 μl RNaseOut, je 6 μl CIP (Calf-Intestinal-Phosphatase), CIP-Puffer, TAP (Tabak-Säure-Pyrophosphatase), 10x TAP-Puffer, T4-RNA-Ligase, 10x T4-RNA-Ligase-Puffer und 10 mM ATP, 6 x 250 ng GeneRacer RNA Oligo, 2 x 1 ml Phenol/Chloroform, 36 μl Muschelglykogen, 200 μl Natriumacetat (3 M), je 225 μl GeneRacer 5' Primer, 5' Nested-Primer, 3' Primer und 3' Nested-Primer, 20 μl Kontroll-RNA (HeLa Gesamt-RNA, 500 ng/μl), je 15 μl Kontroll-Primer A und Kontroll-Primer B.1; SuperScript III RT Modul: 6 μl SuperScript III Reverse Transkriptase (200 U/μl), 24 μl 5x Erststrang-Puffer, 15 μl DTT (0,1 M), 6 μl RNaseH (2 U/μl), 6 μl Random-Primer (100 ng/μl), 6 μl GeneRacer Oligo dT-Primer (900 ng/μl), 6 μl dNTP Mix (je 10 mM), 10 S.N.A.P. Säulen, TOPO TA Klonierungskit für die Sequenzierung (-20 °C), ausreichend Reagenzien und One Shot TOP10 chemisch kompetente E. coli
Klonierungskit
pCR4-TOPO TA
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