Gewährleistet die Amplifikation von Transkripten in ausschließlich voller Länge, indem abgeschnittene Botschaften aus dem Amplifikationsprozess entfernt werden
Marke: Invitrogen™ L150201
1480.48 CHF gültig bis 2025-03-28
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Das GeneRacer Kit bietet eine Methode zur Gewinnung von 5'- und 3'-Enden der cDNA in voller Länge anhand einer bekannten cDNA-Sequenz aus exprimierten Sequenzteilstücken (ESTs), subtrahierter cDNA, Differentialanzeige oder Bibliothekssuche. RACE PCR-Produkte können einfach und schnell kloniert werden: entweder mit dem Zero Blunt TOPO PCR Klonierungskit für die Sequenzierung (stumpfendige PCR-Produkte) oder mit dem TOPO TA Klonierungskit für die Sequenzierung (PCR-Produkte mit 3' A-Überhängen). Anhand der bereitgestellten Protokolle lassen sich die cDNA-Enden von seltenen (30 Kopien/Zelle) und langen (9 KB) Transkripten amplifizieren und ab 1 μg Gesamt-RNA sequenzieren.
Klonierung, PCR und Echtzeit-PCR, Reverse Transkription, cDNA-Bibliotheken und Bibliotheksaufbau
Versandbedingung: Trockeneis
| TOP10 | |
| Jedes Modul wie angegeben lagern: GeneRacer™ Modul (-20 °C): • 2 × 1,5 ml steriles Wasser • 24 µl RNaseOut™ • je 6 µl CIP (Calf Intestinalphosphatase), CIP-Puffer, TAP (Tabak-Säure-Pyrophosphatase), 10X TAP-Puffer, T4-RNA-Ligase, 10X T4-RNA-Ligase-Puffer und 10 mM ATP • 6 × 250 ng GeneRacer™ RNA Oligo • 2 × 1 ml Phenol/Chloroform • 36 µl Muschelglykogen • 200 µl Natriumacetat (3 M) • je 225 µl GeneRacer™ 5′ Primer, 5′ Nested-Primer, 3′ Primer und 3′ Nested-Primer • 20 µl Kontroll-RNA (HeLa Gesamt-RNA, 500 ng/µl) • je 15 µl Kontroll-Primer A und Kontroll-Primer B.1 SuperScript™ III RT Modul (-20 °C) • 6 µl SuperScript™ III Reverse Transkriptase (200 U/µl) • 24 µl 5X Erststrang-Puffer • 15 µl DTT (0,1 M) • 6 µl RNaseH (2 U/µl) • 6 µl Random-Primer (100 ng/µl) • 6 µl GeneRacer™ Oligo dT-Primer (900 ng/µl) • 6 µl dNTP Mix (je 10 mM) 10 S.N.A.P.™ Säulen (Raumtemperatur) TOPO TA Cloning™ Kit für die Sequenzierung (-20 °C) • Ausreichend Reagenzien und One Shot™ TOP10 chemisch kompetente E. coli (bei -80 °C lagern) zur Klonierung von 10 GeneRacer™ PCR-Produkten; GeneRacer Modul (-20 °C), SuperScript III RT Modul (-20 °C), kompetente E. coli (bei -80 °C lagern), S.N.A.P. Säulen (Raumtemperatur), TOPO TA Klonierungskit für die Sequenzierung (-20 °C) |
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| Reverse Transkription | |
| GeneRacer™, SuperScript™, TA Cloning™, TOPO™ | |
| 1 Kit |
| TOPO, TA | |
| Kit | |
| GeneRacer Modul: 2 x 1, ml steriles Wasser, 24 μl RNaseOut, je 6 μl CIP (Calf-Intestinal-Phosphatase), CIP-Puffer, TAP (Tabak-Säure-Pyrophosphatase), 10x TAP-Puffer, T4-RNA-Ligase, 10x T4-RNA-Ligase-Puffer und 10 mM ATP, 6 x 250 ng GeneRacer RNA Oligo, 2 x 1 ml Phenol/Chloroform, 36 μl Muschelglykogen, 200 μl Natriumacetat (3 M), je 225 μl GeneRacer 5' Primer, 5' Nested-Primer, 3' Primer und 3' Nested-Primer, 20 μl Kontroll-RNA (HeLa Gesamt-RNA, 500 ng/μl), je 15 μl Kontroll-Primer A und Kontroll-Primer B.1; SuperScript III RT Modul: 6 μl SuperScript III Reverse Transkriptase (200 U/μl), 24 μl 5x Erststrang-Puffer, 15 μl DTT (0,1 M), 6 μl RNaseH (2 U/μl), 6 μl Random-Primer (100 ng/μl), 6 μl GeneRacer Oligo dT-Primer (900 ng/μl), 6 μl dNTP Mix (je 10 mM), 10 S.N.A.P. Säulen, TOPO TA Klonierungskit für die Sequenzierung (-20 °C), ausreichend Reagenzien und One Shot TOP10 chemisch kompetente E. coli | |
| Klonierungskit | |
| pCR4-TOPO TA |
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