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Invitrogen™ pENTR™/SD/D-TOPO™ Cloning Kit, with One Shot™ Mach1™-T1R Chemically Competent E. coli
Verwenden Sie diese hocheffiziente, fünf-minütige Klonierungsstrategie, um ein PCR-Produkt mit stumpfem Ende in den Vektor zu klonieren
Marke: Invitrogen™ K263520
1049.40 CHF gültig bis 2024-12-31
Benutzen Sie den Promotions-Code "21651" um Ihren Promotions-Preis zu erhalten.
Includes: Gebrauchsfertiger TOPO Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, universelle M13-Sequenzierprimer, TOP10 oder Mach1R E. coli, S.O.C. Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid.
Beschreibung
- Stumpfendige PCR-Produkte klonen bei einer Effizienz von über 90 % direktional in pENTR™/SD/D-TOPO™ Entry-Vektoren und enthalten eine vorgeschaltete Shine-Dalgarno-Sequenz zur Expression in Prokaryoten
- Rasches Hin- und Herschicken klonierter Gene zwischen mehreren Vektorsystemen
- Zuverlässige Leistung
- Für Zugang zum Gateway System eine PCR-Amplifikation des zu untersuchenden Gens durchführen und Produkt direkt an den mitgelieferten mit Topoisomerase geladenen pENTR™/SD SD/SD D-TOPO Vektor anhängen. Danach 5 Minuten lang inkubieren und die mitgelieferten kompetenten E. coli-Zellen transformieren
- Die daraus resultierenden attL-Klone sind nun für eine effiziente Rekombination mit den gewünschten Vektoren bereit.
- Der pENTR™/SD SD/SD D-TOPO™ Vektor enthält einen T7-Gen-10-translationalen Enhancer und eine Ribosombindungsstelle (RBS) für die optimale Expression von nativem Protein nach Rekombination mit prokaryotischen Vektoren
- Verwenden Sie Vektor auch für die Expression in anderen Hostsystemen durch Rekombination mit verschiedenen Destination-Vektoren
- Der Vektor verfügt über M13- und T7-Primer-Sequenzierungsstellen und attL-Rekombinationsstellen, welche die PCR-Produkteinführungsstelle flankieren. Dadurch können Klone einfach sequenziert und in eine Auswahl von attR-haltigen Zielvektoren rekombiniert werden
- Ein Kanamycin-Resistenz-Gen und ein pUC-Ursprung dienen der Selektion und hohen Kopiepropagation in E. coli
- Keine PCR-Reinigung, Vektorvorbereitung oder andere zeitintensive DNA-Manipulationsschritte
- Ein vierbasiger Überhang auf den Vektorpaaren mit vierbasiger Sequenz im Vorwärtsprimer der PCR-Reaktion sorgt für Direktionalität hin zur Topoisomerase-Ligationsreaktion
Klonierung, Gateway-Klonierung
Spezifikation
Direktionales TOPO™ | |
20 reactions | |
TOPO-Klonierungskit | |
pENTR |
Jedes direktionale TOPO™ pENTR Cloning Kit enthält den passenden gebrauchsfertigen TOPO™ Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, universelle M13-Sequenzierprimer, chemisches TOP10 oder Mach1-T1R Chemisch E. coli, S.O.C. Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid. Lagerung kompetenter E. coli bei -80 °C. Alle anderen Komponenten bei –20 °C lagern. | |
One Shot™ | |
20 reactions |
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