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Invitrogen™ pENTR™/D-TOPO™ Cloning Kit, with One Shot™ Mach1™-T1R Chemically Competent E. coli
Verwenden Sie eine hocheffiziente, fünfminütige Klonierungsstrategie zum direkten Klonieren von PCR-Produkten mit stumpfen Enden in einen Entry-Vektor für das Gateway System oder MultiSite Gateway System
Marke: Invitrogen™ K243520
Additional Details : Gewicht : 0.07000kg
Includes: Gebrauchsfertiger TOPO Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, universelle M13-Sequenzierprimer, TOP10 oder Mach1R E. coli, S.O.C. Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid.
Beschreibung
- Stumpfendige PCR-Produkte können direktional mit mehr als 90%iger Effizienz kloniert werden, ohne Ligase, Verfahren nach der PCR oder Restriktionsenzyme.
- Rasches Hin- und Herschicken klonierter Gene zwischen mehreren Vektorsystemen
- Zuverlässige Leistung
- Für Zugang zum Gateway System eine PCR-Amplifikation des zu untersuchenden Gens durchführen und Produkt direkt an den mitgelieferten mit Topoisomerase geladenen pENTR/D-TOPO-Vektor anhängen. Danach 5 Minuten lang inkubieren und die mitgelieferten kompetenten E. coli-Zellen transformieren
- Die daraus resultierenden Gateway Entry-attL-Klone sind nun für eine effiziente Rekombination mit den gewünschten Gateway Destination-Vektoren bereit.
- Der pENTR/D-TOPO Vektor verfügt über M13- und T7-Primer-Sequenzierstellen und attL-Rekombinationsstellen, die an die Stelle der PCR-Produkteinfügung grenzen. Dadurch können Klone einfach sequenzgeprüft und in eine Auswahl von attR-haltigen Gateway Zielvektoren rekombiniert werden
- Ein Kanamycin-Resistenz-Gen und ein pUC-Ursprung dienen der Selektion und hohen Kopiepropagation in E. coli
- Ein vierbasiger Überhang auf den Vektorpaaren mit vierbasiger Sequenz im Vorwärtsprimer der PCR-Reaktion sorgt für Direktionalität hin zur Topoisomerase-Ligationsreaktion
- Verschieben Sie dieselbe DNA-Sequenz zwischen verschiedenen Vektoren, ohne Bedarf an Restriktionsenzymen, Ligase, Subklonierungsschritten, Screening zahlloser Kolonien oder Resequenzierung
Klonierung/ Gateway Klonierung
Spezifikation
| Direktionales TOPO™ | |
| One Shot™ | |
| pENTR |
| Jedes direktionale TOPO™ pENTR Cloning Kit enthält den passenden gebrauchsfertigen TOPO™ Vektor, dNTPs, Salzlösung, steriles Wasser, universelle M13-Sequenzierprimer, chemisches TOP10 oder Mach1-T1R Chemisch E. coli, S.O.C. Medium und ein pUC19 Kontrollplasmid. Lagerung kompetenter E. coli bei -80 °C. Alle anderen Komponenten bei –20 °C lagern. | |
| TOPO-Klonierungskit |
Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.