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Invitrogen™ Champion™ pET SUMO Expression System
Erzielen Sie hohe Proteinexpressionen in E. coli
Marke: Invitrogen™ K30001
Includes: Die Champion pET-SUMO TA Cloning Box enthält linearisierten Champion pET-SUMO Vektor, steriles Wasser, dNTPs, 10x PCR-Puffer, Kontrolltemplate und -primer, T4-DNA-Ligase, 10x Ligationspuffer, Primer für Sequenzierung oder PCR-Screening und eine Expressionskontrolle. Die SUMO Protease Box enthält SUMO-Protease und Puffer. Die TOP10-Box enthält einundzwanzig 21 x 50 μl-Aliquoten chemisch kompetenter E. coli, S.O.C.-Medium und ein Kontrollplasmid. Die One Shot BL21(DE3)-Box enthält einundzwanzig 21 x 50 μl-Aliquoten chemisch kompetenter E. coli, S.O.C.-Medium und ein Kontrollplasmid.
Beschreibung
- Für verbesserte Löslichkeit von exprimierten Fusionsproteinen nutzt das Verfahren eine Fusion mittels kleinem Ubiquitin-Modifikator (SUMO), aus der wachsenden Familie der mit Ubiquitin verwandten Proteine
- Im Gegensatz zu Ubiquitin ist SUMO an der In-vivo-Stabilisierung und -Lokalisierung von Proteinen beteiligt
- Nach der Expression kann der 11 kd-SUMO-Anteil durch hochspezifische und aktive SUMO (ULP-1) Protease am Carboxylterminus gespalten werden, wodurch natives Protein entsteht
- Erhöhte Löslichkeit mit N-terminaler SUMO-Fusion
- Durch die hocheffiziente Spaltung entsteht natives Protein von Interesse mit SUMO (ULP-1) Protease
- Durch die hochspezifische Spaltung wird ausgeschlossen, dass das Protein von Interesse unabhängig von der Aminosäuresequenz intern verdaut wird
- Signifikant höhere Stabilität mit SUMO-Fusion – kann für die Herstellung kleiner Peptid-T7lac-Promotor für eine hohe Proteinexpression verwendet werden
- N-terminales 6xHis-Tag für die Proteindetektion und -aufreinigung
Bakterienexpression, Proteinexpression, Proteine, Expression, Isolierung und Analyse
Spezifikation
| Induzierbar | |
| T7, lacO | |
| Keine | |
| Kanamycin (KanR) | |
| SUMO | |
| Zellbasierte Expression | |
| TA Cloning™ | |
| pET |
| IPTG | |
| Expressionssystem | |
| Das Champion™ pET SUMO Expressionssystem wird als komplettes System geliefert. Die Champion™ pET SUMO TA Cloning™ Box enthält linearisierten Champion™ pET-SUMO Vektor, steriles Wasser, dNTPs, 10x PCR-Puffer, Kontrolltemplate und -primer, T4-DNA-Ligase, 10x Ligationspuffer, Primer für Sequenzierung oder PCR-Screening und eine Expressionskontrolle. Bei -20°C lagern. Die SUMO Protease Box enthält SUMO-Protease und Puffer. Bei -80°C lagern. Die One Shot™ TOP10 Box enthält einundzwanzig 50 µl-Aliquoten chemisch kompetenter E. coli, S.O.C.-Medium und ein Kontrollplasmid. Bei -80°C lagern. Die One Shot¤ BL21 (DE3)-Box enthält einundzwanzig 50 µl-Aliquoten chemisch kompetenter E. coli, S.O.C.-Medium und ein Kontrollplasmid. Bei -80°C lagern. | |
| BL21(DE3) | |
| E. coli | |
| His Tag (6x), SUMO Tag | |
| 20 reactions | |
| Champion™, TA Cloning™ |
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