Thermo Scientific™ Van91I (PflMI) (10 U/μL)

Beschreibung

Lambda-DNA verdaut mit Van91I (PflMI), 0,7 % Agarose, 14 Spaltstellen

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.

5'..C C A NN N N^N T G G...3'

3'..G G T N^N N NN A C C...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität

• 1x Puffer R: 10 mM Tris-HCl (pH 8,5 bei 37 °C), 10 mM MgCl₂, 100 mM KCl und 0,1 mg/ml BSA
• Bei 37 °C inkubieren

Lagerungspuffer

• Van91I wird geliefert in:10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25 °C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden

• Nach 50-fachem Verdau mit Van91I können über 90% der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte

• Dam: keine Überlappung – keine Auswirkung
• Dcm: möglicherweise Überlappung – blockiert
• CpG: keine Überlappung – keine Auswirkung
• EcoKI: keine Überlappung – keine Auswirkung
• EcoBI: keine Überlappung – keine Auswirkung&

Verdau von Agarose-eingebetteter DNA

• Es sind mindestens 5 Units des Enzyms für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich

Hinweis:

Van91I wird durch überlappende dcm-Methylierung blockiert. Verwenden Sie zur Vermeidung von dcm-Methylierung einen dam-, oder dcm-Stamm wie z. B. GM2163 (Nr. M0099).