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Thermo Scientific™ T4 RNA Ligase (10 U/μl)
Katalysieren Sie die ATP-abhängige Bildung von Phosphodiesterbindungen zwischen 5'-P und 3'-OH-Enden von Oligonukleotiden, einsträngiger RNA und DNA.
Marke: Thermo Scientific™ EL0021
83.07 CHF gültig bis 2025-03-28
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Beschreibung
T4 RNA Ligase katalysiert die ATP-abhängige intra- und intermolekulare Bildung von Phosphodiesterbindungen zwischen 5'-Phosphat und 3'-Hydroxyenden von Oligonukleotiden, einsträngiger RNA und DNA.
Das Substrat muss mindestens ein Nukleosid-3',5'-biphosphat für intermolekulare Reaktion und ein 8-Basen-Oligonukleotid für intramolekulare Reaktion sein.
- Quelle: E.-coli-Zellen mit einem geklonten Gen 63 von T4-Bakteriophagen
- Molekulargewicht: 43,6 kDa Monomer
- Die Abwesenheit von Ribonukleasen, Exo-, Endodesoxyribonukleasen und Phosphatasen wurde durch geeignete Qualitätstests bestätigt.
- E.coli-Zellen mit einem klonierten Gen 63 des T4-Bakteriophagen
Molekulargewicht:
- 43,6 kDa Monomer
Definition der Aktivitätseinheit:
- Eine Einheit katalysiert die Bildung von 1 nmol von 5 ft-[32P]-(A)12-18 in einer phosphatasebeständigen Form in 30 Minuten bei 37°C.
- Die Enzymaktivität wird in folgender Mischung gemessen: 50 mM Tris-HCl (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 10 μM 5'-[32P]-(A)12-18 (10 μM in 5 ft.-Enden)
Lagerungspuffer:
- Das Enzym wird mit 20 mM Tris-HCl (pH 7,5), 1 mM DTT, 50 mM KCl, 0,1 mM EDTA, 0,03 % (v/v) ELUGENT Reinigungsmittel und 50 % (v/v) Glycerin geliefert
10X Reaction Buffer:
- 500 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 25°C), 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 10 mM ATP
Hemmung und Inaktivierung:
- Hemmstoffe: Metallchelatoren, die SH-Gruppe modifizierende Reagenzien (8).
- Inaktivierung durch 10-minütiges Erhitzen auf 70°C.
Empfohlen für:
RNA 3'-Endmarkierung mit Cytidin 3',5'-bis [Alpha-32P]-Phosphat (1); Verbindung von RNA mit RNA (2); Synthese von Oligoribonukleotiden und Oligodeoxyribonukleotiden (3, 4); spezielle Modifikationen von tRNAs (5); Oligodeoxyribonukleotid-Ligation mit einzelsträngigen cDNAs für 5 ft. RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) (6); ortsspezifische Erzeugung von zusammengesetzten Primern für PCR (7)
Hinweis:
Die empfohlene BSA-Konzentration im Reaktionsgemisch beträgt 0,1 mg/ml.

Spezifikation
10 U/μl | |
10x Reaktionspuffer | |
T4 RNA Ligase |
T4 RNA Ligase | |
1000 E |
Zertifikate
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