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Molecular Probes™ Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 Durchflusszytometrie-Assay-Kit

Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 Durchflusszytometrie-Assay-Kit

Marke: Molecular Probes™ C10419

1239.50 CHF gültig bis 2025-06-30
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Artikelnummer. 11370952

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Beschreibung

Das Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 Durchflusszytometrie-Assay-Kit ist ein einfacher, stabilerer Assay für die Analyse der DNA-Replikation in proliferierenden Zellen im Vergleich zu herkömmlichen BrdU-Methoden. Neu synthetisierte DNA wird mit dem 633/5 nm-Laser des Durchflusszytometers analysiert.

Präzise – Hervorragende Ergebnisse im Vergleich zu BrdU-Assays

Schnell – Ergebnisse schon nach 90 Minuten

Kostengünstig – Mehr Assays pro Kit

Auswahlhilfe für alle Click-iT™ EdU und Click-iT™ Plus EdU-Assays für die Durchflusszytometrie anzeigen.

Eine fortschrittliche Methode, die Ihnen bessere Ergebnisse liefert als BrdU
Die genaueste Methode der Proliferationsanalyse ist die direkte Messung der DNA-Synthese. Ursprünglich wurde dies durch die Einbindung radioaktiver Nukleoside wie 3H-Thymidin durchgeführt. Diese Methode wurde durch die Antikörper-basierte Erkennung des Nukleosid-Analogons Bromdesoxyuridin (BrdU) ersetzt. Click-iT™ Plus EdU Durchflusszytometrie-Assay-Kits sind eine neuartige Alternative zum BrdU-Assay. EdU (5-Ethinyl-2´-Desoxyuridin) ist ein Thymidin-Analogon, das während der aktiven DNA-Synthese in die DNA eingebaut wird. Die Erkennung beruht auf Klick-Chemie, einer Kupfer-katalysierten kovalenten Reaktion zwischen einem Azid und einem Alkin. In dieser Anwendung befindet sich das Alkin auf der Ethinylverbindung der EdU, während das Azid mit dem Farbstoff Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647 oder Pacific BlueTM gekoppelt ist. Standardmethoden der Durchflusszytometrie werden zur Bestimmung des prozentualen Anteils der S-Phase-Zellen in der Population verwendet (Abb. 1).

Unter milden Bedingungen ist die Verwendung mit Zellzyklus-Farbstoffen und Antikörpern möglich
Die Vorteile der Click-iT™ EdU-Markierung sind bei der Durchführung des Assays leicht erkennbar (Abb. 2). Die geringe Größe des Farbstoff-Azids ermöglicht den effizienten Nachweis des eingebauten EdU-Nukleosids unter schonenden Bedingungen, während die standardmäßige Aldehyd-basierte Fixierung und Lösungsmittelpermeabilisierung für das Click-iT™ Detektionsreagenz ausreichend sind, um Zugang zur DNA zu erhalten. Dies steht im Gegensatz zu BrdU-Assays, die eine Denaturierung der DNA (mit HCI, Wärme oder Verdauung mit DNase) zur Exposition des BrdU erfordern, so dass es mit einem anti-BrdU-Antikörper nachgewiesen werden kann. Bei Anwendung der HCl-Methode kann eine Probenverarbeitung für das BrdU-Assay zu Signalveränderungen in der Zellzyklus-Verteilung, sowie zu einer Zerstörung der Antigenerkennungsstellen führen. Im Gegensatz dazu ist das anwenderfreundliche EdU-Zellproliferationskit mit Zellzyklus-Farbstoffen kompatibel. Dieses EDU-Assay-Kit kann auch mit Antikörpern gegen Oberflächen- und intrazelluläre Marker gebündelt werden.

Schnelles und einfaches Protokoll
Das Click-iT™ EDU-Protokoll basiert auf den Aldehydfixierungs- und Lösungsmittelpermeabilisierungsschritten zur immunhistochemischen Antikörper-Markierung, doch EDU ist auch mit mit anderen Fixierungs-/Permeabilisierungswirkstoffen,
einschließlich Saponin und Methanol, kompatibel. Nur fünf Arbeitsgänge sind zur Vorbereitung Ihrer Zellproliferationsdaten-Analyse erforderlich:

Behandlung von Zellen mit EdUM

Fixieren und Permeabilisieren von Zellen

Nachweis von S-Phase-Zellen mit Click-iT™ Nachweis-Cocktail für die Dauer von 30 Minuten

Einmal waschen

Analyse

Genaue Ergebnisse auf kostengünstige Weise
Durch Erhöhung der Assay-Anzahl pro Kit ist das Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 647 Durchflusszytometrie-Assay-Kit kostengünstiger als herkömmliche BrdU-Assays und bestens für umfangreiche Experimente geeignet.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke bei Menschen und Tieren vorgesehen.

Spezifikation

Inhalt und Lagerung	Enthält EdU (5-Ethynyl-2‘-Deoxyuridin), Alexa Fluor™ 647-Azid, wasserfreies Dimethylsulfoxid (DMSO), Click-iT™ Fixiermittel, Click-iT™ saponin-basierten Permeabilisierungs- und Waschpuffer, Kupfer(II)-Sulfat und Click-iT™ EdU-Pufferadditiv. Bei 2 bis 8 °C lagern Mit Trockenmittel und vor Licht geschützt lagern.
Zur Verwendung mit (Geräte)	Durchflusszytometer
Farbstofftyp	Alexa Fluor™ 647
Format	Röhrchen
Produktlinie	Alexa Fluor™, Click-iT™
Versandbedingung	Raumtemperatur

Nachweisverfahren	Fluoreszent
Produkttyp	Durchflusszytometrie-Assaykit
Emission	650⁄670
Umweltfreundliche Eigenschaften	Weniger gefährlich
Menge	100 assays

Produktvorschläge Dokumentation

Dokumentation

Scientific Resources

Posters

Poster: Evaluation of Cellular Senescence through Fluorescence Characterization DateigrößeVersion: 1.5 MB

Zertifikate

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Chargennummer

5 Ergebnisse gefunden

Chargennummer	Art des Zertifikats	Datum	Catalog Number
Chargennummer3021946	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum24/09/2024	Catalog NumberC10419
Chargennummer2911351	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum03/06/2024	Catalog NumberC10419
Chargennummer2725315	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum23/08/2023	Catalog NumberC10419
Chargennummer2507898	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum09/08/2022	Catalog NumberC10419
Chargennummer2354347	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum17/09/2021	Catalog NumberC10419

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