RNA-Isolierung direkt aus Vollblut
Marke: Invitrogen™ AM1928
1113.38 CHF gültig bis 2025-06-21
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25 ml Elutionslösung; 40 ml Lyselösung; 25 ml Acid-Phenol:Chloroform; 5 ml Natriumacetat-Lösung; 35 ml Waschlösung 1; 70 ml Waschkonzentrat 2/3; 100 ml RNAlater-Lösung; 40 Filterkartuschen; 80 Entnahmeröhrchen; 100 μl DNase I, 8 U/μl; 850 μl 20x DNase-Puffer; 1,2 ml DNase-Deaktivierungsreagenz; 1 ml Formaldehyd-Lastfarbstoff. Dieses Kit enthält genügend Reagenzien für 40 RNA-Isolierungen aus 300–500 μl Vollblut.
Das RiboPure-Blood Kit ist für die Isolierung hochwertiger RNA direkt aus Vollblut vorgesehen. Das Kit kombiniert zwei Methoden der RNA-Aufreinigung für die effiziente Entfernung von Blutbestandteilen (Protein, Häme, genomische DNA und RNasen), die nachgelagerte Verfahren beeinträchtigen können. Das Kit enthält genügend Reagenzien für 40 RNA-Reinigungen aus Vollblutproben von jeweils 0,3–0,5 ml.
Anwendungen Das RiboPure Blutkit produziert eine hohe Ausbeute reiner RNA direkt aus Vollblut. Dadurch müssen die Leukozyten vor der RNA-Aufreinigung nicht mehr isoliert werden. Mit dem RiboPure-Blood Kit rückgewonnene RNA kann in anspruchsvollsten Anwendungen einschließlich Echtzeit-RT-PCR und Array-Analyse zum Einsatz kommen. Die durchschnittliche RNA-Ausbeute liegt zwischen 2–4 μg/0,5 ml Vollblut (Abweichungen sind auf Unterschiede in den WBC-Zahlen zwischen den Proben zurückzuführen).
RNA im Vollblut stabilisieren Beim Sammeln von Blutproben für die RNA-Analyse ist oft die Lagerung der Proben vor der RNA-Isolierung erforderlich. Das RiboPure Blutkit enthält RNAlater-Lösung zur Stabilisierung der RNA in Vollblut. Außerdem wird damit das Genexpressionsprofil der Zellen “eingefroren”. Behandelte Proben können bei Umgebungstemperatur für längere Zeit (bis zu drei Tage oder mehr) sicher aufbewahrt werden. Blutproben, die in der RNAlater Lösung gelagert werden, liefern RNA von vergleichbarer Qualität wie direkt verarbeitete Blutproben.
Einfaches Verfahren ergibt hochreine RNA Das RiboPure Blutverfahren besteht aus drei Schritten: 1) Zugabe von Lyselösung direkt zu mit RNAlater behandeltem oder frischem Blut, 2) erste RNA-Aufreinigung durch Phenol-Chloroform-Extraktion und 3) endgültige RNA-Aufreinigung über einen Glasfaserfilter. Danach kann eine zusätzliche DNase-Behandlung mit den im Kit enthaltenen DNA-free Reagenzien durchgeführt werden. Das gesamte Verfahren, einschließlich DNase-Behandlung, kann in weniger als einer Stunde abgeschlossen werden.
Zubehörprodukte Die RNA kann anschließend für die mRNA der weißen Blutkörperchen (Leukozyten) mit unseren GLOBINclear™ Kits zur selektiven Entfernung von Globintranskripten angereichert werden. Das Mouse RiboPure-Blood RNA Isolation Kit (Kat.- Nr. AM0951) steht auch für die Rückgewinnung von Gesamt-RNA — und optional von microRNA — direkt aus Mäuse- oder Rattenblut zur Verfügung. RiboPure Blut (Maus) enthält mit RNAlater™ Lösung vorbeladene Probenröhrchen zur Vermeidung von RNA-Abbau und zur Erhaltung der RNA-Profile.
Nicht mit hohen Durchsatz kompatibel (manuell)
Aufreinigung und Analyse von DNA und RNA, RNA-Extraktion, Gesamt-RNA-Isolierung, Gesamt-RNA aus Blut
| • 25 ml Elutionslösung (4 °C) • 40 ml Lyselösung (4 °C) • 25 ml Acid-Phenol:Chloroform (4 °C) • 5 ml Natriumacetat-Lösung (4 °C) • 35 ml Waschlösung 1 (Raumtemperatur/4 °C) • 70 ml Waschkonzentrat 2/3 (Raumtemperatur/4 °C) • 100 ml RNAlater™ Lösung (Raumtemperatur) • 40 Filterkartuschen (Raumtemperatur) • 80 Entnahmeröhrchen (Raumtemperatur) • 100 µl DNase I, 8 U/µl (-20 °C, frostfrei) • 850 µl 20x DNase-Puffer (-20 °C) • 1,2 ml DNase-Deaktivierungsreagenz (-20 °C) • 1 ml Formaldehyd-Lastfarbstoff (-20 °C) Dieses Kit enthält genügend Reagenzien für 40 RNA-Isolierungen aus 300–500 µl Vollblut. |
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| Organische Extraktion, Spin-Säule | |
| Blut | |
| Nicht mit hohen Durchsatz kompatibel (manuell) | |
| 40 Aufreinigungen | |
| Ambion™, RiboPure™ | |
| Bis zu 0,5 ml Vollblut | |
| 4µ g |
| Filterkassette, Rörchen | |
| 30 min | |
| Gesamt-RNA | |
| Mikroarray-Analyse, quantitative Echtzeit-PCR (qPCR), reverse Transkriptase PCR (RT-PCR), Northern Blotting | |
| 100 µl -1 ml-Blutproben (mittelgroß) | |
| 40 preps | |
| Gesamt-RNA |
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