Thermo Scientific™ pNFkB Tluc16-DD Vector for Luciferase Assays

Beschreibung

Die Thermo Scientific pMCS-Tluc16-Vektoren sind Vektoren mit mehreren Klonierungsstellen (MCS), die für die Untersuchung der Genregulation mit dem intrazellulären TurboLuc™16 (Tluc16)-Luziferase-Reporter eine Promotor-Sequenz akzeptieren.

• Intrazelluläres Luziferase-Gen aus Tluc16, optimiert für hohe Expression in Säugetiersystemen
• Mehrere Klonierungsstandorte bieten Vielseitigkeit für die Übertragung regulatorischer Elemente von einem Vektor zum anderen
• Synthetischer polyA-Terminator und Transkriptionelle Pausenstelle (Transcriptional Pause Site, TPS), die stromaufwärts von MCS integriert sind, um unspezifische transkriptionelle Durchlesungen zu minimieren
• Die Dual-Destabilisierungs-Technologie (DD) reduziert die Ansammlung von Tluc16-Luziferase-mRNA und -Protein in Zellen und verbessert so die Reaktionsgeschwindigkeit des Assays
• Optimierter minimaler Kernpromotor (minP) und 5'-UTR-Bereich für effiziente Expression von Tluc16-Luziferase
• Hygromycin-Resistenzgen zur Verwendung als Selektionsmarker zur Erzeugung stabiler Zelllinien von Säugetieren
• Die vorbereiteten pNF-κB- und pCRE-Tluc16-DD-Vektoren wurden entwickelt, um die Aktivierung von NFκB-Protein und cAMP-bindendem Protein (CREB) in Säugetierzellen zu überwachen
• Die vorbereitete pEF1α-Varietät enthält eine modifizierte Version des Elongationsfaktor 1α (EF1α)-Promotors für die konstitutive Tluc16-Luziferase-Expression in Säugetierzellen

Tluc16-Luziferase ist eine 16 kDa große, neuartige, intrazelluläre Luziferase, die aus der Metridia-Ruderfußkrebs-Luziferase-Familie abgeleitet wurde. Die Wildtyp-Luziferase wurde modifiziert, um ihre Größe zu reduzieren, ihre Helligkeit zu erhöhen und ihre intrazelluläre Expression zu ermöglichen. Ein synthetischer polyA-Terminator und eine Transkriptionelle Pause-Stelle (Transcriptional Pause Site, TPS) sind vor dem MCS enthalten, um nicht-spezifische transkriptionelle Durchlesung zu minimieren. Die Tluc16-Luziferaseaktivität kann mit dem Thermo Scientific TurboLuc™ einstufigen Leucht-Assay-Kit gemessen werden.