Invitrogen™ PrestoBlue™ HS Zellviabilitätsreagenz

Beschreibung

PrestoBlue™ HS Zellviabilitätsreagenz ist eine gebrauchsfertige resazurin-basierte Lösung, die als Indikator für die Zellgesundheit dient, indem sie die Reduktionskraft lebender Zellen zur quantitativen Messung der Lebensfähigkeit verwendet. Beim Eintritt in lebende Zellen wird Resazurin zu Resorufin reduziert, einer roten und stark fluoreszierenden Verbindung. Hohe Hintergrundfluoreszenz durch verschiedene Kontaminanten reduziert die Leistung von Reagenzien auf Resazurin-Basis. Zur Verbesserung der Leistung wurde ein innovativer Reinigungsprozess entwickelt, der diese Kontaminanten entfernt. Dieses hochgereinigte, ungiftige Resazurin wurde in der Standardformulierung von PrestoBlue verwendet, wodurch das PrestoBlue HS Zellviabilitätsreagenz entstand. Veränderungen der Lebensfähigkeit lassen sich mit einem Absorptions- oder Fluoreszenz-Plattenlesegerät leicht erkennen. Das PrestoBlue HS Zellviabilitätsreagenz wurde für den schnellen und zuverlässigen Nachweis der Lebensfähigkeit von Säugetierzellen optimiert.

PrestoBlue HS Zellviabilitätsreagenzien bieten u. a. folgende Vorteile:

• Entfernung von Kontaminanten aus Resazurin — Es tritt eine > 50 %ige Reduzierung der Hintergrundfluoreszenz auf
• Das um > 100% höhere Signal-Hintergrund-Verhältnis — führt zu einem großen Testsignalfenster
• Hochempfindliches Reagenz mit linearer Reaktion — kann kleinste Mengen bis zu 10 Zellen pro Well nachweisen
• Praktisches Format: Add-and-Read — Kein Mischen, kein Waschen, keine Zelllyse und kompatibel mit fluoreszenz- oder absorptionsbasierten Messgeräten
• Optimiert für den zuverlässigen Nachweis der Lebensfähigkeit von Säugetierzellen in nur 10 Minuten

Die Messung von Änderungen der Lebensfähigkeit der Zellen ist eine grundlegende Methode zur Beurteilung der Zellgesundheit, der Bestimmung der Genotoxizität und der Evaluierung von Krebsmedikamenten. Die Zellgesundheit kann durch den Nachweis von Veränderungen in mehreren Schlüsselindikatoren überwacht werden, darunter Veränderungen der Plasmamembranintegrität, DNA-Synthese, DNA-Gehalt, Enzymaktivität, Vorhandensein von ATP und zelluläre Reduktionsumgebung.

Die Überwachung von Veränderungen in der zellulären reduzierenden Umgebung oder der metabolischen Aktivität mit Reagenzien auf Resazurin-Basis ist ein etablierter und zuverlässiger Indikator für die Lebensfähigkeit oder den Tod von Zellen. Beim Eintritt in lebende Zellen reduziert die zelluläre Reduktionsumgebung Resazurin zu Resorufin, einer rot gefärbten und stark fluoreszierenden Verbindung. Lebensfähige Zellen wandeln Resazurin kontinuierlich in Resorufin um und erhöhen so die Gesamtfluoreszenz des Mediums, das die Zellen umgibt. Darüber hinaus führt die Umwandlung von Resazurin zu Resorufin zu einer ausgeprägten Farbveränderung, so dass die Zellviabilität auch mit absorptionsbasierten Plattenlesern nachgewiesen werden kann.

Als Folge der Synthese- und Herstellungsprozesse enthalten alle Reagenzien auf Resazurin-Basis eine nachweisbare Menge an Resorufinkontamination. Die Menge der Kontamination kann zwischen den Quellen des Materials und den Herstellungsbedingungen stark variieren und zu Unterschieden bei der nachweisbaren Hintergrundfluoreszenz beitragen. Es wurde ein innovatives Verfahren entwickelt, das das kontaminierende Resorufin entfernt, was zu dem hochreinen Resazurin führt, das im PrestoBlue HS Zellviabilitätsreagenz verwendet wird. Dieses hochreine Resazurin erzeugt eine > 50%ige Verringerung der Hintergrundfluoreszenz und eine > 100%ige Steigerung des Signal-Hintergrund-Verhältnisses. Die Lebensfähigkeit von Säugetierzellen kann nach einer 10-minütigen Inkubation mit PrestoBlue HS Zellviabilitätsreagenz nachgewiesen werden. Da keine Lyse erforderlich ist, kann die verdünnte PrestoBlue HS Lösung entfernt und durch ein vollständiges Nährmedium ersetzt werden, um die Zellen weiter zu kultivieren.