Invitrogen™ pHrodo™ Antibody Labeling Kits

Beschreibung

Elevate biopharmaceutical research with pHrodo Antibody Labeling kits, designed to characterize antibody internalization, a critical step during antibody-drug conjugate research and development. Kits provide a simple, detailed protocol and advanced purification columns to easily label and purify antibodies and other large proteins. Amine-reactive pHrodo dyes covalently bind to antibodies and other proteins to produce bright, soluble conjugates whose fluorescence increases in acidic organelles including endosomes and lysosomes. Antibody internalization can be evaluated using flow cytometry, fluorescence microscopy, and high-content screening.

Das pHrodo iFL Red Microscale Proteinmarkierungskit und das pHrodo iFL Green Microscale Proteinmarkierungskit enthalten die für die einfache Markierung von drei im Mikromaßstab aufgereinigten Protein- oder Antikörperproben (20 – 100 µg) mit pHrodo iFL Red oder pHrodo iFL Green Farbstoff benötigten Reagenzien. Diese Kits enthalten aminreaktive pH-empfindliche pHrodo iFL Red und Green STP-Ester-Farbstoffe, die kovalent an freie Lysine binden, wo auch immer diese Lysine in einem Antikörper oder Protein vorkommen.

PHrodo IFL Red und pHrodo IFL Green Farbstoffe sind weiterentwickelte Versionen der pHrodo Red und pHrodo Green Farbstoffe und optimiert auf das Erzeugen von hellen, löslichen Biokonjugaten für die Untersuchung von Antikörperinternalisierung, Endozytose und Phagozytose. Diese Farbstoffe sind zudem besser löslich als die vorherigen pHrodo Red und pHrodo Green Farbstoffe und daher hilfreicher für die Markierung von Antikörpern, die andernfalls während der Konjugation aus der Lösung ausfallen können. pHrodo IFL Red- und pHrodo IFL Green Farbstoffe sind außerhalb der Zelle nicht fluoreszierend, fluoreszieren jedoch in Hellrot bzw. Hellgrün bei Absinken des pH-Werts in ihrer Umgebung, wie dies in Phagosomen und Endosomen der Fall ist.

Die pHrodo IFL Red und Green Kits für die Markierung im Mikromaßstab bieten die folgenden Vorteile:
• Anwenderfreundlich – Markierung dauert in der Regel zwei Stunden, mit weniger als 30 Minuten manueller Arbeitszeit
• Vielseitig – können Proteine mit Molekülmassen 12 – 150 kDa markieren
• Anpassbar – Erstellen Sie Ihre eigenen Sonden zum Untersuchen von Antikörperinternalisierung, Phagozytose und Endozytose.

Das pHrodo Deep Red Markierungskit für Säugetier- und Bakterienzellen enthält alle für das Markieren von Lebendzellen von (Säugertieren oder Bakterien) zwecks Untersuchung von Phagozytose und Endozytose benötigten Reagenzien. Das Kit ist für die Diskriminierung von Zellen mit oder ohne Phagozytose optimiert, da der pH-empfindliche pHrodo Deep Red Farbstoff mit niedrigem Hintergrund in neutraler Umgebung kein Signal zeigt und nur in sauren Umgebungen fluoresziert. Diese herausstechende Eigenschaft des pHrodo Deep Red Farbstoffs ermöglicht eine schnelle Entwicklung von Assays und steigert die Sicherheit der Ergebnisse von Untersuchungen zu Stoffwechselwegen von Endozyten und Phagozyten. Der pHrodo Deep Red Farbstoff ermöglicht eine bessere Unterscheidung von internalisierter Cargo von außerhalb der Zelle, da er einen ungefähren pKa von 5 hat und erst dann fluoresziert, wenn er in das späte Endosom und Lysom eintritt. pHrodo Deep Red Farbstoff kann mit einem Fluoreszenzfilterset Cy5 erkannt werden und wurde für die Verwendung in einer Vielzahl von Anwendungen validiert, einschließlich Durchflusszytometrie, Fluoreszenzmikroskopie, High-Content-Analyse (HCA) und High-Throughput-Screening (HTS).

Das pHrodo Deep Red Markierungskit für Säugetier- und Bakterienzellen bietet die folgenden Vorteile:
• Multiplexing – pHrodo Deep Red Farbstoff kann mit einer Vielzahl von blauen, grünen und roten Farbstoffen und Reportern wie GFP und RFPs, Mitosox Green oder Red, CellEvent Caspase 3/7 Green oder Red, NucBlue, TMR und vielen weiteren überlagert werden.
• Einfachheit – einfach nachvollziehbare schrittweises Protokoll
• Hervorragendes Signalfenster – minimaler Hintergrund bei neutralem pH ermöglicht maximales Signal-Rausch-Verhältnis für verlässliche Ergebnisse
• Niedrige pK – eliminiert unspezifische Signale von nicht internalisierter Cargo, nur Fluoreszenz in späten Endosomen und Lysosomen

Bestellinformation

Trocken im Kühlschrank (2 – 8 °C) lagern, vor Licht schützen und nicht einfrieren.