Invitrogen™ pHrodo™ BioParticles™ Conjugates for Phagocytosis and Phagocytosis Kit, for Flow Cytometry

Beschreibung

Achieve faster staining and more accurate results without the need for wash steps or quencher dye with pH-sensitive pHrodo BioParticles conjugates and phagocytosis kit for flow cytometry. pHrodo BioParticles conjugates for phagocytosis are non-fluorescent outside the cell at neutral pH but fluoresce brightly in acidic pH environments, such as those of endosomes and lysosomes. They can be used in imaging, HCA, and HTA applications. The pHrodo BioParticles phagocytosis kit offers rapid assessment of phagocytic activity in whole blood using flow cytometry.

Die Fluoreszenz des neuartigen pHrodo Farbstoffs erhöht sich erheblich, wenn der pH-Wert von neutral auf sauer sinkt. Daher eignet sich dieser Farbstoff ideal für die Untersuchung von Phagozytose und ihrer Regulierung durch Medikamente und/oder Umweltfaktoren. Außerhalb der Zelle ist der Farbstoff nicht fluoreszierend, wodurch Waschschritte und Quencher-Farbstoffe entfallen. Nach der Internalisierung fluoresziert der Farbstoff in sauren Umgebungen von Endosomen und Lysosomen hell und ermöglicht eine schnelle Assayentwicklung und eine hohe Sicherheit der Ergebnisse bei der Untersuchung von Phagozytenpfaden und deren Regulierung durch Medikamente und/oder Umweltfaktoren. pHrodo Farbstoffkonjugate können daher in Plattenlesegeräten, Fluoreszenzmikroskopie und Durchflusszytometrie verwendet werden.

Das pHrodo Red S. aureus BioParticles Konjugat für die Phagozytose (Best.- Nr. A10010) ermöglicht schnelle und genaue Assayergebnisse. pHrodo Red Farbstoffkonjugate sind außerhalb der Zelle nicht fluoreszierend, fluoreszieren jedoch in Phagosomen in hellem Rot. pHrodo Red E. coli BioParticles Konjugat für die Phagozytose (Best.- Nr. P35361) erkennt Phagozytose und Endozytose, zeichnet sich durch eine geringere Signalvariabilität und verbesserte Zeitsteuerung in empfindlichen Experimenten aus und kann in Multiplexanwendungen mit einer Vielzahl von blauen, grünen und fern-roten Farbstoffen und Reportern wie GFP, Fuo-4, Calcein, NucBlue, CellEvent Caspase 3/7 Green, Mitosox Green und Mitotracker Deep Red, unter vielen anderen, verwendet werden. Die optimalen Maximalwerte bei Absorption und Fluoreszenzemission des pHrodo Red BioParticles Konjugats beträgt ungefähr 560 nm bzw. 585 nm. Der Fluorophor wird jedoch mit dem 488 nm-Argonionen-Laser, der in den meisten Durchflusszytometern installiert ist, problemlos angeregt.

Das pHrodo Green E. coli BioParticles Phagozytosekit (Best.- Nr. A10025) für die Durchflusszytometrie ist für die schnelle und praktische Messung von Phagozytenaktivität in Vollblutproben mittels Durchflusszytometrie ausgelegt. Die Kits enthalten alle Reagenzien, die für die Beurteilung der Partikelaufnahme und der Lyse von roten Blutkörperchen erforderlich sind.

pHrodo Deep Red ist ein pH-Sensorfarbstoff mit niedrigem Hintergrund, der bei neutralen Bedingungen kein Signal zeigt und nur in sauren Umgebungen fluoresziert. Der pHrodo Deep Red Farbstoff ermöglicht eine bessere Unterscheidung von internalisierter Cargo von außerhalb der Zelle, da er einen ungefähren pKa von 5 hat und erst dann fluoresziert, wenn er in das späte Endosom und Lysom eintritt. pHrodo Deep Red Farbstoff kann mit einem Fluoreszenzfilterset Cy5 erkannt werden und wurde für die Verwendung in einer Vielzahl von Anwendungen validiert, einschließlich Durchflusszytometrie, Fluoreszenzmikroskopie, High-Content-Analyse (HCA) und High-Throughput-Screening (HTS). Der Farbstoff kann zudem mit einer Vielzahl von blauen, grünen und roten Farbstoffen und Reportern wie GFP und RFPs, Mitosox Green oder Red, CellEvent Caspase 3/7 Green oder Red, NucBlue oder TMR und vielen weiteren anderen überlagert werden.

pHrodo Deep Red E. coli BioParticles Konjugat für Phagozytose (Best.- Nr. P35360) ist ein waschfreies, fluorogenes Reagenz mit niedrigem Hintergrund, das für die Untersuchung der Phagozytose in einem lebenden Zellsystem vorgesehen ist. Dieses Konjugat ist außerhalb der Zelle nicht fluoreszierend, fluoresziert in Phagosomen jedoch dunkelrot. Die niedrige pKa des pHrodo Deep Red E. coli BioParticles Konjugats eliminiert das nicht spezifische Signal von nicht-internalisierter Cargo und fluoresziert, wenn es in das späte Endosom und Lysom eintritt.

Wie unsere pHrodo Red Farbstoffkonjugate auch liefern die pHrodo Green Farbstoffkonjugate schnellere und genauere Ergebnisse als alle anderen Phagozytoseassays. pHrodo Green Konjugate sind außerhalb der Zelle bei neutralem pH-Wert nicht fluoreszierend, fluoreszieren jedoch bei saurem pH-Wert, z. B. in Phagosomen, hellgrün. Verwenden Sie das vorgefertigte pHrodo Green S. aureus BioParticles Konjugat (Best.- Nr. P35367) und pHrodo Green Zymosan BioParticles Konjugat (Best.- Nr. P35365) für Phagozytose in Bildgebungs-, HCA-, HTS- und Durchflussanwendungen.

Diese pHrodo Konjugate enthalten ausreichend Reagenz zum Ausführen von 100 Tests, wenn in jeder Vertiefung einer 96-Well-Platte 100 µl gegeben werden. Zudem können die Konjugate mit einer Vielzahl von blauen, roten und fern-roten Farbstoffreportern wie Mitosox Red, CellEvent Caspase 3/7 Red, NucBlue, RFPs und MitoTracker Deep Red und vielen weiteren mehr überlagert werden.

pHrodo Red Zymosan BioParticles Konjugat (Best.- Nr. P35364) ist ebenfalls erhältlich, und pHrodo Green Farbstoff ist verfügbar als Konjugat von E. coli BioParticles (Best.- Nr. P35366).