Thermo Scientific™ PacI (10 U/μL)

Beschreibung

pJET1 DNA/SdaI-Fragmente mit eingefügter PacI-Erkennungsstelle, verdaut mit PacI, 1 % Agarose, 2 Spaltstellen

Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.

5'...T A A T▵T A A...3'

3'...A T▵T A A T T...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität:

• 1x Puffer PacI: 10 mM Bis-Tris Propan-HCl (pH 6,5 bei 37°C), 10 mM MgCl₂ und 0,1 mg/ml BSA
• Bei 37°C inkubieren

Lagerungspuffer:

• PacI wird geliefert in: 10 mM Kaliumphosphat (pH 7,5 bei 25°C), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden:

• Nach 50-fachem Verdau mit PacI können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und über 95 % davon erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte:

• Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
• Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
• CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoKI: möglicherweise Überlappung — Auswirkung unbestimmt
• EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung

Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:

• Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter pJET1-DNA mit eingefügter PacI-Erkennungssequenz in 16 Stunden erforderlich

Kompatible Enden:

• BstKTI, SfaNI (AsiSI), PvuI