Applied Biosystems™ PureQuant™ Th17 Assay

Beschreibung

Assays basieren auf TaqMan qPCR und messen genomische DNA-Methylierung an bestimmten Standorten, die als eindeutige Kennung dienen. Die Assays umfassen Standards und Kontrollen, und jede 96-Well-Platte kann bis zu sieben Testproben aufnehmen. Die Ergebnisse werden mit einem kostenlosen Analysewerkzeug als Prozentsatz des Zielzelltyps aus den gesamten Eingabezellen bereitgestellt.

Der PureQuant™ Th17-Assay nutzt eine bestimmte demethylierte Stelle im proentzündlichen Zytokin-Interleukin 17A (IL17). Dieses Zytokin wird ausschließlich von Th17-Helferzellen produziert.

Die Vorteile:

• Bewährte Leistung – Kerntechnologie wird seit mehr als einem Jahrzehnt zur Identifizierung und Quantifizierung von Immunzelltypen verwendet
• Einfach standardisiert – die qPCR-Methode ermöglicht konsistente Ergebnisse über mehrere Anwender, Geräte und Standorte hinweg
• Erleichtert die Einreichung von Zulassungsanträgen – auf Anfrage bereitgestellte Support-Datei für regulatorische Anforderungen; festgelegte Leistungsspezifikationen gemäß den ICHQ2(R1)-Richtlinien
• Planungsflexibilität – der Assay kann mit frischen oder gefrorenen Zellen/gDNA durchgeführt werden

Die Assays enthalten alle Reagenzien, Standards und Kontrollen, die für die Durchführung des Assays erforderlich sind. Die Komponenten umfassen:

• Kalibrator: Der Plasmid-basierte Kalibrator beherbergt die genomischen Zielregionen in äquimolaren Verhältnissen und enthält GAPDH. Wird einer Bisulfitkonvertierung unterzogen, gefolgt von einer Schätzung der Anzahl der Kopien über die qPCR-Standardkurve. Ermöglicht die Schätzung des Assay-spezifischen Bisulfit-Wirkungsfaktors: Das Verhältnis zwischen TPG/GAPDH-Kopienzahlen, gemessen vom selben Plasmid.
• Referenz: Prüft die Assay-Leistung. Besteht aus genomischer DNA, die aus menschlichem Blut gepoolter gesunder Spender gewonnen wird. Die Referenzwerte stellen den erwarteten Bereich des Zielzellentyps dar. CD8+-Zellen sind beispielsweise im Allgemeinen häufiger als Treg- oder Th17-Zellen.
• Standards: Ermitteln die unbekannte Anzahl der Kopien. Bestehen aus sechs Verdünnungen, die einen linearen dynamischen Bereich von 4 Logs (30 bis 31250 Kopien) abdecken. Absolute Anzahlen der Kopien können zuverlässig über die Steigung und den Achsabschnitt der jeweiligen Standardkurven bestimmt werden.

Dieses Produkt wird an einem Standort mit einem ISO9001-zertifizierten Qualitätsmanagementsystem hergestellt.