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Molecular Probes™ Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrie-Assay-Kit
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Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ Durchflusszytometrie-Assay-Kit

Marke:  Molecular Probes™ C10425

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Artikelnummer. 11300962

  • 1090.00 CHF / 1 Stück
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Beschreibung

Beschreibung

Das Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrie-Assay-Kit ist ein einfacher, stabilerer Assay für die Analyse der DNA-Replikation in proliferierenden Zellen im Vergleich zu herkömmlichen BrdU-Methoden. Neu synthetisierte DNA wird mit dem 488 nm-Laser des Durchflusszytometers analysiert.

  • Präzise— hervorragende Ergebnisse im Vergleich zu BrdU-Assays
  • Schnell – Ergebnisse schon nach 90 Minuten
  • Kostengünstig – Mehr Assays pro Kit

    Auswahlhilfe für alle Click-iT™ EdU und Click-iT™ Plus EdU-Assays für die Durchflusszytometrie anzeigen.

    Eine fortschrittliche Methode, die Ihnen bessere Ergebnisse liefert als BrdU
    Die genaueste Methode der Proliferationsanalyse ist die direkte Messung der DNA-Synthese. Ursprünglich wurde dies durch die Einbindung radioaktiver Nukleoside wie 3H-Thymidin durchgeführt. Diese Methode wurde durch die Antikörper-basierte Erkennung des Nukleosid-Analogons Bromdesoxyuridin (BrdU) ersetzt. Click-iT™ Plus EdU Durchflusszytometrie-Assay-Kits sind eine neuartige Alternative zum BrdU-Assay. EdU (5-Ethinyl-2´-Desoxyuridin) ist ein Thymidin-Analogon, das während der aktiven DNA-Synthese in die DNA eingebaut wird. Die Erkennung beruht auf Klick-Chemie, einer Kupfer-katalysierten kovalenten Reaktion zwischen einem Azid und einem Alkin. In dieser Anwendung befindet sich das Alkin auf der Ethinylverbindung der EdU, während das Azid mit dem Farbstoff Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647 oder Pacific BlueTM gekoppelt ist. Standardmethoden der Durchflusszytometrie werden zur Bestimmung des prozentualen Anteils der S-Phase-Zellen in der Population verwendet (Abb. 1).

    Unter milden Bedingungen ist die Verwendung mit Zellzyklus-Farbstoffen und Antikörpern möglich
    Die Vorteile der Click-iT™ EdU-Markierung sind bei der Durchführung des Assays leicht erkennbar (Abb. 2). Die geringe Größe des Farbstoff-Azids ermöglicht den effizienten Nachweis des eingebauten EdU-Nukleosids unter schonenden Bedingungen, während die standardmäßige Aldehyd-basierte Fixierung und Lösungsmittelpermeabilisierung für das Click-iT™ Detektionsreagenz ausreichend sind, um Zugang zur DNA zu erhalten. Dies steht im Gegensatz zu BrdU-Assays, die eine Denaturierung der DNA (mit HCI, Wärme oder Verdauung mit DNase) zur Exposition des BrdU erfordern, so dass es mit einem anti-BrdU-Antikörper nachgewiesen werden kann. Bei Anwendung der HCl-Methode kann eine Probenverarbeitung für das BrdU-Assay zu Signalveränderungen in der Zellzyklus-Verteilung, sowie zu einer Zerstörung der Antigenerkennungsstellen führen. Im Gegensatz dazu ist das anwenderfreundliche EdU-Zellproliferationskit mit Zellzyklus-Farbstoffen kompatibel. Dieses EDU-Assay-Kit kann auch mit Antikörpern gegen Oberflächen- und intrazelluläre Marker gebündelt werden.

    Schnelles und einfaches Protokoll
    Das Click-iT™ EDU-Protokoll basiert auf den Aldehydfixierungs- und Lösungsmittelpermeabilisierungsschritten zur immunhistochemischen Antikörper-Markierung, doch EDU ist auch mit mit anderen Fixierungs-/Permeabilisierungswirkstoffen,
    einschließlich Saponin und Methanol, kompatibel. Nur fünf Arbeitsgänge sind zur Vorbereitung Ihrer Zellproliferationsdaten-Analyse erforderlich:

  • Behandlung von Zellen mit EdUM
  • Fixieren und Permeabilisieren von Zellen
  • Nachweis von S-Phase-Zellen mit Click-iT™ Nachweis-Cocktail für die Dauer von 30 Minuten
  • Einmal waschen
  • Analyse

    Genaue Ergebnisse auf kostengünstige Weise
    Durch Erhöhung der Assay-Anzahl pro Kit ist Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrie-Assay-Kit kostengünstiger als herkömmliche BrdU-Assays und ausgezeichnet für umfangreiche Experimente geeignet.

    Nur für Forschungszwecke. Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke bei Menschen und Tieren vorgesehen.
    TRUSTED_SUSTAINABILITY
  • Spezifikation

    Spezifikation

    Enthält EdU (5-Ethynyl-2‘-Deoxyuridin), Alexa Fluor™ 488-Azid, wasserfreies Dimethylsulfoxid (DMSO), Click-iT™ Fixiermittel, Click-iT™ saponin-basierten Permeabilisierungs- und Waschpuffer, Kupfer(II)-Sulfat und Click-iT™ EdU-Pufferadditiv.
  • Bei 2 bis 8 °C lagern
  • Mit Trockenmittel und vor Licht geschützt lagern.
    Durchflusszytometer
    Alexa Fluor™ 488
    Röhrchen
    Click-iT™
    Raumtemperatur
    Fluoreszent
    Durchflusszytometrie-Assaykit
    488
    Weniger gefährlich
    50 assays
    Produktvorschläge

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    Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.