Cytiva Amersham™ QuickStain Proteinmarkierungskit

Beschreibung

• Schnelle SDS-PAGE-Analyse: Vormarkierte Proteinproben mit gebrauchsfertigem Cy5-Farbstoff für einen schnellen, empfindlichen Nachweis ohne Gelfärbung und Entfärbung
• Einfache Western Blot-Normalisierung: Verwenden Sie das standardmäßige 30 Minuten-Protokoll für quantitative Western Blotting-Ergebnisse, um so die Notwendigkeit von Beladungskontrollen zu vermeiden
• Großer Probenbereich: Effektive Kennzeichnung von komplexen Proben oder reinen Proteine von 1 μg/ml bis 20 mg/ml ohne Vormessen der Proteinkonzentrationen
• Gute Empfindlichkeit: So empfindlich wie Silberfärbung mit breiterem Dynamikbereich
• Breiter dynamischer Bereich: Mit einem Fluoreszenz-Scanner oder -Bildwandler können Sie gleichzeitig Hauptband- und Verunreinigungsgrade mit einer Intensität von bis zu 0.1 % des Hauptbands erkennen
• Vielseitigkeit: Laden Sie Proben auf selbstgegossene Gele oder eine Vielzahl von handelsüblichen Gelen. Dies ist möglich, da die meisten Materialien eine geringe Cy5-Fluoreszenz aufweisen

Wählen Sie zwischen zwei schnellen Markierungsprotokollen

Amersham QuickStain basiert auf der Cy5-NHS-Ester-Markierung reaktiver Aminogruppen in Proteinen. Zuerst verdünnen Sie Proteinproben 10-fach im optimierten Markierungspuffer. Fügen Sie dann eine bestimmte Menge Cy5 hinzu. Inkubieren Sie für 5 Minuten bei 95 °C für qualitative Analysen oder 30 Minuten bei Raumtemperatur für quantitative Anwendungen.

Nachweis von Proteinen direkt nach Elektrophorese oder Blotting

Sie müssen Ihr Gel für die SDS-PAGE-Analyse nicht färben und entfärben. Sie können auch vermeiden, dass Ponceau S Ihre Blots für die Western Blotting-Analyse färbt. Für jede Anwendung können Sie Proteine einfach mit einem Fluoreszenzscanner wie dem Amersham Typhoon-Scanner oder einem CCD-Bildgebungsgerät wie dem Amersham Imager 600 RGB erkennen.

Vergleich mit Coomassie- und Silberfärbung

Amersham QuickStain liefert im Vergleich zur Coomassie-Färbung deutlich bessere Signal-Rausch- und Signal-Hintergrund-Verhältnisse. Es eignet sich gut für die Reinheitsanalyse während der Proteinaufreinigung, da es die Empfindlichkeit der Silberfärbung aufweist, aber einen größeren Dynamikbereich hat, um sowohl schwache als auch starke Signale zu quantifizieren.

Gesamtproteinnachweis für die Western Blot-Normalisierung

Mit Amersham QuickStain können Sie die Notwendigkeit von Beladungskontrollen vermeiden. Verwenden Sie Cy5, um den Gesamtproteingehalt einer Probe und einen zweiten Farbstoff, um das Sie interessierende Protein nachzuweisen. Diese Multiplex-Fähigkeit ermöglicht es Ihnen, die Übertragungseffizienz zu bewerten und mithilfe der Normalisierung auf Beladungsfehler einzustellen.